细胞因子诱导的杀伤(cytokine induced killer,CIK)细胞在肿瘤的支持性治疗和供体淋巴细胞输注治疗方面有着较好的应用前景.该文以脐血单个核细胞为起始细胞,就如何提高体外培养中CIK细胞的生物活性和扩增能力进行了实验研究,并探讨了使用低温冷冻技术保存CIK细胞的可行性,最后尝试采用搅拌悬浮体系培养CIK细胞,并对影响培养过程的若干参数进行了考察研究.研究结果表明:在所考察范围内,培养时间的延长有利于提高CIK细胞的扩增能力、细胞毒活性和CD3<'+>CD56<'+>细胞含量;以抗人CD28mAb为辅助信号的共刺激,有利于增强CIK细胞的细胞毒活性;而使用无血清培养基培养的CIK细胞与有血清条件下无显著差别.使用抗CD3mAb刺激生成的CIK细胞在扩增能力、细胞毒活性和CD3<'+>CD56<'+>细胞含量方面都优于使用PHA.细胞激活后将其中的有丝分裂原洗脱有利于提高细胞的扩增能力,另外抗CD3mAb孔板包被加入的效果比悬浮加入好.脐血单个核细胞的冷冻复苏对诱导扩增CIK细胞没有显著影响;冷冻复苏后,CIK细胞的生物活性也不会降低.最后,该文对CIK细胞在搅拌体系中的悬浮培养过程进行了尝试,以克服静态培养所存在的多种缺陷,并对培养过程的若干参数进行了考察和研究.结果表明,利用悬浮搅拌体系可以成功诱导扩增CIK细胞,并且所获得的细胞具有与静态培养相似的细胞表型和细胞毒活性.接种密度和搅拌速率对CIK细胞的细胞毒活性和其中CD3<'+>CD56<'+>细胞含量没有影响,但显著影响细胞的体外扩增能力.换液方式(批培养、细胞回流换液和细胞稀释换液)对CIK细胞的生物活性和体外扩增能力有显著影响,结果证明换液培养有利于CIK细胞的扩增,且其中的CD3<'+>CD56<'+>细胞含量高,细胞毒活性强;细胞回流换液和稀释换液培养的CIK细胞具有相似的生物活性,但稀释换液可显著提高细胞的扩增能力.以上研究结果为未来应用生物反应器大规模培养和诱导扩增CIK细胞提供了参考.