重离子辐照对杂交兰的组培和诱变效应

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杂交兰(hybrid Cymbidium)是采用国兰与大花蕙兰杂交培育而成的兰花新类型,集大花蕙兰的花大、色艳、花期长和国兰的清香、典雅为一体,具有很高的观赏价值、经济价值、文化价值和广阔的市场前景。重离子辐照育种具有育种年限短、突变率高、突变范围广、可以产生新奇变异类型等特点,已广泛应用于花卉育种中。本研究以‘小凤兰’根状茎和‘君红兰’类原球茎为诱变材料,探究重离子辐照对杂交兰中间繁殖体存活和分化的效应;对重离子辐照后的‘小凤兰’组培苗进行遗传多样性分析,并对重离子辐照获得的‘线艺君豪兰’的组培快繁特性进行研究。主要研究结果如下:1.重离子辐照对杂交兰中间繁殖体存活和分化效应重离子辐照导致‘小凤兰’根状茎和‘君红兰’类原球茎死亡。1-6代‘小凤兰’根状茎的死亡率分别为8.89%、46.67%、53.33%、84.45%、95.56%、100%,‘君红兰’类原球茎死亡率分别为6.67%、53.33%、71.11%、77.78%、82.22%、100%。表明,50 Gy剂量、10 Gy/min剂量率不适合以中间繁殖体为诱变材料的‘小凤兰’和‘君红兰’12C6+重离子辐照育种。重离子辐照完全抑制‘小凤兰’根状茎和‘君红兰’类原球茎分化,这种抑制作用直到第6代都没有恢复。2.重离子辐照的‘小凤兰’组培苗的遗传多样性50 Gy辐照的‘小凤兰’组培苗比0 Gy和60 Gy辐照的组培苗植株要高、叶片要长,50 Gy和60 Gy辐照的‘小凤兰’组培苗植株叶片数、根数要少于0 Gy的组培苗。SSR标记分析结果表明,0 Gy和50 Gy辐照的‘小凤兰’组培苗未扩增出多态性条带,而60 Gy辐照的‘小凤兰’组培苗扩增出两条多态性条带,多态率是2.0%。3.‘线艺君豪兰’的组培快繁特性重离子辐照获得的‘线艺君豪兰’,其线艺性状是稳定的。‘线艺君豪兰’茎尖根状茎的形成时间明显比‘君豪兰’短,诱导率比‘君豪兰’的高。切割处理延长‘线艺君豪兰’根状茎的诱导时间,但可以提高根状茎的诱导率,在纵切处理下,‘线艺君豪兰’的诱导率为90%。‘线艺君豪兰’根状茎绝对增殖率和‘君豪兰’的没有显著差异,在MS培养基上,‘线艺君豪兰’根状茎的增殖倍数为1.59,显著高于MS+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1+AC 0.3 g·L-1培养基上的增殖倍数。‘线艺君豪兰’的起始芽分化时间明显早于‘君豪兰’,芽苗分化率、芽分化率、苗分化率、平均芽分化数和平均苗分化数也显著高于‘君豪兰’,但‘线艺君豪兰’高于2 cm的芽苗分化率与‘君豪兰’差异不显著。通过以上研究,明确了12C6+重离子辐照对‘小凤兰’根状茎和‘君红兰’类原球茎存活和分化的影响以及‘线艺君豪兰’的组培快繁特性,利用SSR分子标记分析得到两株变异植株,为建立有效的杂交兰重离子辐照诱变育种技术体系,选育突破性的杂交兰新品种(系)奠定了基础。
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