拟南芥miR159及其靶标基因在白粉病抗性中的功能分析

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MicroRNAs是长度约为21个核苷酸的植物内源非编码小RNAs,在植物生长发育、抗病过程以及其他生物和非生物胁迫过程中都发挥着重要的作用。之前我们实验室通过Solexa测序发现,在白粉病菌侵染大麦的过程中,多个大麦内源miRNAs的表达水平发生显著的变化,其中包括miR159。初步研究表明,大麦miR159及其靶标基因GAMYB可能参与大麦白粉病的抗性。  本研究通过生物信息学在拟南芥中预测到了8个GAMYB类的同源基因,分别是MYB33、MYB65、MYB81、MYB97、MYB101、MYB104、MYB12、DUO1。基因表达数据分析显示,除MYB33和MYB65外,其他MYB基因在叶片中表达量很低。序列比对分析发现MYB33和MYB65与GAMYB的相似性最高。通过烟草瞬时表达技术验证了MYB33是miR159的一个靶标。受白粉菌诱导miR159的表达及MYB33和MYB65的表达谱发生明显变化。过表达miR159a增强了拟南芥对白粉菌的抗性,而myb33、myb65单突变体以及双突变体myb33.myb65也表现出增强的白粉菌抗性。以上实验结果表明拟南芥中miR159的潜在靶标基因可能是MYB33和MYB65,它们负调控拟南芥对白粉菌的抗性,而miR59可能通过负调控这两个靶标基因参与拟南芥对白粉菌的抗病。
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