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目的:通过凝胶层析法和聚乙二醇(Polyethylerie glycol PEG)沉淀法两个样品预处理程序实验比较,确定PEG沉淀预处理再行电化学发光检测在筛检巨催乳素血症的临床应用可行性;采用PEG沉淀预处理再行电化学发光检测应用于高催乳素血症与巨催乳素血症的鉴别诊断,结合物理诊断、临床表现、相关激素、以及临床治疗效果综合分析了两者的不同,以减少了真高催乳血症的误诊率.
方法:1.实验条件优化:通过固定离心时间,对相对离心力与离心温度进行PEG沉淀样品预处理程序进行条件优化.
2. 两样品预处理实验对比:通过凝胶层析法和PEG沉淀法两个样品预处理程序实验比较,随机分层单盲选取120例PEG沉淀预处理再行电化学发光检测单体催乳素回收率在0~100﹪各个分布段的样品同时进行凝胶层析法检测,确定PEG沉淀预处理再行电化学发光检测在筛检巨催乳素血症的临床应用可行性,通过ROC曲线分析确定PEG沉淀预处理再行电化学发光检测检出巨催乳素血症阈值;计算PEG沉淀预处理再行电化学发光检测此试验对巨催乳素血症的诊断敏感性、特异性、总有效率.并评估PEG沉淀预处理再行电化学发光法检测测定小分子催乳素回收率的重复性.
3.试验分组:PEG沉淀预处理再行电化学发光检测高催乳素血症260例,含真高催乳素血症组与巨催乳素血症,分析两组患者在内分泌(LH、E2)、临床症状(月经不调及乳头溢液、不孕)、治疗方面的差别.并与正常对照组45例相对照.
4. 试验组检测结果分析: 通过相应物理诊断、内分泌等相关激素检测以及临床治疗效果验证等综合分析真高催乳素血症与巨催乳素血症,分析两组患者的不同,并治疗前与冶疗后E2、PRL及LH浓度及单体催乳素回收率比较的,分析真高催乳素与巨催乳素血症在治疗效果方法的差别.
结果:1.PEG沉淀样品预处理法结果:
(1)PEG沉淀样品预处理法最适实验条件:相对离心力1800g,离心温度为18℃,离心时间为10分钟.
(2)PEG沉淀预处理再行电化学发光法检测回收率重复性: 此法测定催乳素浓度精密度,血清A催乳素浓度2190 mIU/L批内回收率(CV)3.2﹪,批间回收率(CV)7.2﹪,血清B催乳素浓度1417 mIU/L,批内回收率(CV)4.1﹪,批问回收率(CV)10.4﹪.
2.试验组检测结果(1)巨催乳素血症患者血清循环催乳素以巨分子催乳素为主,而且大分子催乳素的比例也高于非巨催乳素血症组.
(2)PEG沉淀预处理再行电化学发光法检测单体催乳素回收率诊断巨催乳素血症检出阈值45﹪,对巨催乳素血症的敏感性为98.1﹪,特异性82.68﹪,阳性预测率为80.64﹪,阴性预测率98.27﹪,及总有效率为89.17﹪.
(3)真高催乳素血症组及巨催乳素血症组血清在PEG沉淀法处理前两组总催乳素浓度无显著性差异(P>0.05);处理后两组催乳素浓度有显著性差异(P<0.05),真高催乳素血症的LH、E2浓度低于巨催乳素血症组及正常对照组,两组患者临床体征共同表现月经紊乱、闭经、溢乳,且从统计学上有显著性差异.
(4)治疗前真高催乳素血症组与巨催乳素血症组之间催乳素浓度无显著性差异,真高催乳素血症组治疗后催乳素浓度显著降低(P<0.001),E2浓度升高(P<0.05).但两组的回收率并无明显变化.
结论:
1.PEG沉淀预处理再行电化学发光检测有良好的精密度,使用简单,并与凝胶层析法相关性良好,是临床筛检巨催乳素血症的首选的方法.
2.巨催乳素血症的检测主要依靠实验室检测,常用的样品预处理方法有凝胶层析法和PEG沉淀法,但凝胶层析法操作复杂,重复性差,而PEG沉淀法方法简便,结果重复性好,适用于临床用于巨催乳素血症筛检.
3.巨催乳素血症引起的高催乳素血症是一个常见的现象,其与高催乳素血症的症状相关,但没有直接关系,易引起临床误诊.
4.真高催乳素血症组及巨催乳素血症组是不同质的两类患者,但由于两者临床体征的非特异性,对单个病人来说不能从临床体征上区别巨催乳素血症和真高催乳素血症.应用PEG沉淀预处理再行电化学发光检测测定所有高催乳素血症患者的催乳素浓度,区分两者的差别,减少对真高催乳素血症的误诊.用PEG沉淀预处理再行电化学发光检测筛检巨催乳素血症的能少对真高催乳素血症的误诊,减少病人诊疗费用.
5.巨催乳素血症患者对溴隐亭治疗效果不良,其治疗需寻找新的治疗方法.