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目的:探讨益母草生物碱中主要成分一水苏碱对NE诱导的乳鼠心肌细胞肥大的作用。
方法:1.采用改良Simpson法培养乳鼠心肌细胞,选用NE诱导制作心肌细胞肥大模型,随机分为对照组,NE10-5M、10-6M、10-7M和10-8M组,培养1d、3d、5d后收集细胞,采用图像分析系统测量心肌细胞表面积,BCA法检测细胞蛋白含量,荧光微量测定细胞DNA含量,以表面积及Protein/DNA比值作为心肌细胞肥大的指标,探讨NE诱导心肌细胞肥大的最佳浓度和时间:2.培养乳鼠心肌细胞,随机分为对照组,NE(10-6M)组,Sta高中低剂量(10-4M、10-5M、10-6M)组及Car(10-6M)组。在药物作用的1d、3d、5d和7d后收集细胞,采用ELISA法检测细胞ANP和BNP含量,以细胞表面积、Protein/DNA比值以及ANP和BNP含量作为检测指标,观察益母草水苏碱对肥大心肌细胞的药效学作用。
结果:1.NE10-6M组在刺激细胞第3d后,与对照组比较可显著增大心肌细胞表面积及Protein/DNA的比值(P<0.05)。2.益母草水苏碱作用于细胞1d后,Sta大中小剂量组与NE组比较,各项指标没有统计学差异(P>0.05)。益母草水苏碱作用于细胞3d后,Sta大中剂量组与NE组比较可以明显降低细胞的表面积、Protein/DNA的比值及ANP含量(P<0.05),各组BNP含量没有统计学差异(P>0.05);Sta小剂量组较NE组降低了细胞表面积(P<0.05),其它各项指标没有差异(P>0.05)。益母草水苏碱作用于细胞5d后,Sta大中小剂量组较NE组显著降低细胞的表面积、Protein/DNA的比值及ANP含量(P<0.05),各组BNP含量与NE组比较,有降低的趋势,但是没有统计学差异(P>0.05)。益母草水苏碱作用于细胞7d后,Sm大中小剂量组与NE组比较,明显降低细胞的表面积、Protein/DNA的比值、ANP和BNP含量(P<0.05)。
结论:1.NE10-6M作用于乳鼠心肌细胞3d,成功制备出心肌细胞肥大模型;
2.益母草水苏碱具有抗NE诱导乳鼠心肌细胞肥大的药效学作用。从益母草水苏碱量效和时效的特点来看存在时效的依赖性。