【摘 要】
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λ噬菌体CI阻遏蛋白在控制噬菌体的溶源裂解途径中扮演着重要的角色.通过经典的遗传学方法,已经分离得到几个温敏阻遏蛋白,其中包含有最有名的CIts857温敏阻遏蛋白.在基因工
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λ噬菌体CI阻遏蛋白在控制噬菌体的溶源裂解途径中扮演着重要的角色.通过经典的遗传学方法,已经分离得到几个温敏阻遏蛋白,其中包含有最有名的CIts857温敏阻遏蛋白.在基因工程中,由λ噬菌体P<,L>、P<,R>强启动子和温敏蛋白CIts857构成的表达系统常用来调控外源基因的表达.把培养温度从30℃提升到42℃,能够使CIts857温敏蛋白失活,从而诱导外源基因的表达.研究发现大肠杆菌在温度上升到40℃以后,由于热击产生的蛋白水解酶会显著地加快外源蛋白的分解.而低于40℃时,温敏表达系统调节外源基因的表达效率较低.大肠杆菌的正常生理条件是37℃,该文希望获得在此温度下就具有良好温敏特性的阻遏蛋白.DNA改组技术是一项有效的体外突变重组技术,该技术在对序列相关的基因发生重组的同时,也可引入一定数量的点突变.该实验首次应用DNA改组技术,对野生型CI阻遏蛋白进行体外分子进化,获得了在37℃下温敏诱导效果比CIts857好的5个突变体.
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