纤维堆囊菌菌株的分子鉴别及埃博霉素合成酶基因的克隆

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该论文的研究工作主要分为两个部分:1)纤维堆囊菌菌株的分子鉴定,该文对10株溶纤维素粘细菌的ISR(16-23S rDNA间区)进行了PCR扩增,结果明确指出了溶纤维素粘细菌的rRNA操纵子数目和ISRs的序列信息,并证实了ISRs作为区分密切相关粘细菌菌株工具的有效性.2)埃博霉素合成酶基因的克隆分析,粘细菌可产生大量的次级代谢产物,其中,由纤维堆囊菌产生的聚酮类化合物埃博霉素是一种强的抗癌物质,具有巨大药用开发潜力.目前已报道了埃博霉素基因簇的组成.埃博霉素是由I型PKS(聚酮合酶)和NRPS(非核糖体肽合成酶)杂合基因簇合成的.埃博霉素PKS基因簇是多功能酶,以模块形式组织.每个模块负责一个二碳单元的衍生步骤.我们提取了纤维堆囊菌的染色体组DNA,并通过PFGE确定了DNA片段的大小.根据埃博霉素合成酶基因的序列信息,我们设计了相应于epoA KSQ和epoB PCP的两种探针,并对构建的文库采用噬菌斑杂交法筛选埃博霉素基因簇.对这四个重组噬菌体提取DNA,用SalI酶切,对消化图谱进行了计算机辅助分析.并对消化得到的小片段进行了亚克隆,正在进行进一步的测序分析.
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