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目的：评价激光共焦显微镜在观察兔眼角膜缘干细胞缺乏形态学观察中的作用。
方法：角膜缘干细胞缺乏家兔27只(雌雄不限)分A组为正常眼组，B组为角膜缘干细胞缺乏羊膜移植组，C组角膜缘干细胞缺乏无羊膜移植组。两组的家兔于术后第1，3，7，10，15，30d进行中央角膜各层组织激光共焦显微镜检查。同时做HE染色行病理学观察。
结果：
1．激光共焦显微镜观察结果
通过连续共聚焦扫描，获取手术前后角膜各层平面图像(x，y轴)及纵向断层图像(z轴)，图像均非常清晰。A组角膜表层上皮细胞排列疏松，呈多角型，胞体发暗，边界清晰发亮，明亮的细胞核可见或不可见。B组术后30d后角膜上皮细胞排列整齐，光反射正常。C组术后30d角膜上皮细胞体积增大，排列紊乱，细胞间隙不清，可见多个细胞呈高密度反光；A组角膜前基质细胞边缘欠清，细胞胞核明亮呈纺锤形。后基质角膜细胞核较长，相对前基质密度较低。B组术后30d角膜基质见一些细胞呈梭形，基质产生点状与线形交织的瘢痕组织；基质层内有少量的新生血管，见红细胞在血管内流动。C组角膜基质内大量的炎性细胞浸润、多而粗大的新生血管生成、基质层呈圆盘形网状高密度反光结构，基质细胞排列紊乱，基质细胞间有呈点状分布的较高密度反光的瘢痕组织存在。基质产生可见排列很不规则的线形、点状瘢痕组织，胶原纤维排列紊乱；A组内皮细胞呈规则的六边形，细胞边界呈黑色，胞体发亮，看不到细胞核，边缘发暗。
2．术后1月角膜各层细胞数量测量
术后1月，无羊膜移植组上皮基底细胞数量显著少于羊膜移植组(p＜0.01)。无羊膜移植组基质层水肿减轻，与羊膜移植组浅基质细胞数量有显著减少(p＜0.05)。无羊膜移植组与羊膜移植组深基质细胞数量无显著差异(p＞0.05)，内皮细胞形态无变化，内皮数量无显著差异(p＞0.05)。
3．HE染色：
术后1天，羊膜移植组基质层炎症细胞浸润数与无羊膜移植组无显著差异(p=0.588)。术后3天，羊膜移植组炎性细胞浸润的数量和深度显著少于与无羊膜移植组(p＜0.01)。
结论：激光共焦显微镜能够测定角膜表层上皮细胞、基质细胞和内皮细胞各层的细胞形态，可以在活体对角膜从四维(三维空间和时间)水平进行扫描成像，并提供高清晰度和放大倍率的角膜各层图像，使我们可以从细胞水平上来观察各种角膜疾病的变化及了解疾病的治疗动态过程。另外，纵向断层扫描可同时获得2～3层的角膜细胞图像，达到类似组织切片的效果。提示了激光共焦显微镜可对角膜进行无创伤、实时活体检查，具有高清晰度、确切的深度定位、时间动态观察、纵向断层扫描等优势，更可提供理想的角膜精确、可重复、深径度图像。