蘑菇疣孢霉病生防菌FJ-08的初步研究

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:sun383407949
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培养过程中发现,经分离获得一株蘑菇疣孢霉病生防菌FJ-08,该菌对福建省广泛分布的三类疣孢霉菌有拮抗作用。通过形态特征的观察、生理生化实验、16SrDNA测序鉴定以及采用VITEK全自动微生物鉴定仪进行鉴定。鉴定结果表明该菌为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。FJ-08的培养条件研究结果表明:其对数生长期在30 h-72 h,72h后逐渐进入衰亡期。FJ-08的最适生长温度为37°C,适宜生长的pH范围为6.0-8.0,且FJ-08的最适pH为pH 6.5。接种量为7.00%时,FJ-08的生长量达到最大。FJ-08的最适装液量为100mL/250mL。通过四因子三水平的正交实验结果显示:FJ-08培养条件的最优组合为:温度37°C、pH值6.5、装液量125mL/250mL、接种量9%。影响OD值的主要因素是温度和pH值,且温度的影响较pH更大。营养条件的研究表明,FJ-08对有机氮的利用较好,其中酵母浸膏为最佳利用氮源。D-半乳糖为FJ-08的最佳利用碳源,但结合来源及性价比进行综合考虑,采用以蔗糖为碳源的培养基更合适。FJ-08培养的最适酵母浸膏浓度为7.5%、蔗糖浓度为6.5%。通过FJ-08提取液的LC-MS检测结果,推测FJ-08提取液中起作用的成分可能是表面活性素和伊枯草菌素。从不同处理方法对疣孢霉与双孢蘑菇菌丝生长的影响可知,甲醇对蘑菇As.0002+1菌丝生长的影响很大。随着甲醇添加量的增加,As.0002+1菌丝生长长度越来越短,到X4(培养基中添加2mL甲醇)时菌丝几乎不生长。另外D2(培养基中直接添加发酵液)其中的As.0002+1菌丝生长要优于D1,进一步说明了甲醇对As.0002+1的严重影响。D2与D3(培养基中添加粗提物)相比,两者对As.0002+1菌丝生长的影响也达到了显著水平。但D2对M.p.001菌丝生长的抑制作用比As.0002+1强。另外,D2(培养基中直接添加发酵液)对疣孢霉菌丝生长抑制显著,虽然对蘑菇的菌丝生长的影响也达到了显著水平,但其抑菌率要远远小于对疣孢霉的抑菌率。因此,在防治疣孢霉上,选择D2最为合适。且当浓度达到X1(培养基添加0.5mL的发酵液)时,其对疣孢霉的抑菌作用达到显著,而对蘑菇的影响最小。双孢蘑菇(As.2796)栽培方面,同一处理中,三类疣孢霉对As.2796的感染比例不同。不同处理中,三类疣孢霉对As.2796的感染比例也各异。此外,三种处理均使得三类疣孢霉对As.2796的感染比例比对照要低得多;用提取液处理,三类疣孢霉对As.2796的感染比例较其它处理的低;用甲醇处理的最高。同时,采用不同方式处理后As.2796感染Ⅰ类、Ⅱ类、Ⅲ类疣孢霉的比例均存在显著性差异。但采用上述处理方式栽培出来的蘑菇是否存在不益健康的残留问题还有待进一步研究,以期在双孢蘑菇的生物防治中更好地利用。
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