上世纪九十年代起，心血管疾病已经成为我国居民的首位死亡原因，控制心血管疾病蔓延成为我国21世纪提高人民健康水平的重中之重。早期诊断对减少心脏疾病所致死亡率很重要。心脏生物标志物的正确应用有助于提高诊断准确率，避免漏诊、误诊，指导患者尽早进行有效治疗，减少并发症，并且有助于避免其他更昂贵的检查，从而可以减少医疗资源的浪费，降低医疗成本。因此，建立高灵敏、低成本、快速检测血液中心脏标志物的方法意义重大。　　本研究以免疫学分析技术为基础结合微流体检测技术，开发出了一种能够自驱动快速检测生化标志物的荧光微流体测试卡，为心脏标志物检测提供了一种新的即时床旁检测(point of care，POCT)方法。并分别对超敏CRP(hs-CRP)、心脏标志物肌钙蛋白T(Cardiac troponinT，cTnT)、人心型脂肪酸结合蛋白(Fattyacid binding protein，FABP)等标志物的检测进行了评估。　　本文的文献综述部分简要介绍了当前生化标志物的主要检测方法以及微流体检测技术在生化检测中的应用;详细描述了马来酸酐官能团在蛋白固定中的应用进展以及几种主要心脏标志物在检测中的应用价值。　　实验部分，从基于硅片表面的可视化免疫反应进行心脏标志物的抗体筛选开始，逐步优化了微流体开发制作过程中的一系列基本条件，最终建立了一种微流体自驱动检测方法，并对相关标志物进行了检测，证明了新方法的可行性。主要工作如下:　　1、在基于硅片表面可视化免疫检测方法的基础上，对FABP、cTnT两种心脏标志物的抗体对进行了筛选。从抗体对的反应性、灵敏度、稳定性、检测范围等多方面对抗体组合进行了研究，最终确定了能够有效定量检测两种标志物的抗体组合，为荧光免疫检测体系的建立提供依据和参考体系。　　2、建立了基于微孔板技术的荧光免疫检测方法。从微孔板板材的颜色、板材的处理，荧光探针的种类、捕获抗体的浓度、标记抗体的浓度、量子点的浓度等方面对检测体系进行了优化，建立了FABP和cTnT单独检测和混合检测的标准曲线，曲线呈现良好的线性关系，为微流体时间分辨荧光检测方法的建立提供了基础数据。　　3、建立了一种微流体自驱动时间分辨荧光测试卡。通过对测试卡板材的选择、微通道制作的方法、微流体的模拟等方面研究，建立了微流体测试卡的雏形。通过提拉法涂膜的方式对测试卡底板进行马来酸酐基团修饰，有效解决了捕获抗体固定的问题，通过等离子体修饰法解决了微通道的亲水性修饰问题。并对捕获抗体浓度、标记抗体使用量、样品量、检测延迟时间等条件进行了优化，建立了hs-CRP、FABP和cTnT标准曲线，并对临床实际样本进行了方法学比较研究;进一步建立了cTnT和FABP的联合检测方法。该检测方法检测成本低、制作方法简单、操作简便、能够在10 min以内完成相关标志物的检测，其检测线性范围和灵敏度，均满足临床检验的要求，具有开发成为即时床旁检测(POCT)方法的潜能。