ICU患者导管相关性感染及常见病原菌分子流行病学研究

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目的和意义:   调查同济医院成人综合重症监护病房(intense care unit,ICU)患者的导管使用率、相关性感染率、感染病原谱及其耐药谱;分析中心血管导管相关性血流感染(central-line associated bloodstream infections,CLABSI)、呼吸机相关性肺炎(ventilator-associated pneumonias,VAP)和导管相关性尿路感染(catheter associated urinary tract infection,CAUTI)与导管留置时间和住院时间之间的相关性以及VAP的危险因素;探讨分子生物学方法诊断CLABSI的应用价值;研究VAP常见病原菌的同源性;为找寻感染根源和实施感染控制措施提供依据。   方法:   根据美国疾病控制中心(Centers for Disease Control and disease,CDC)--国家健康卫生安全网络(National Healthcare safety Network,NHSN)制定的相关方案(PATIENT SAFETY COMPONENT PROTOCOL,2006)设计ICU患者CLABSI、VAP及CAUTI的监测方法。前瞻性调查2007年9月~2008年6月同济医院ICU患者的导管使用率(患者导管日/患者住院日)、相关性感染率(感染人数/1000患者导管日)、感染病原谱及其耐药谱;采用直线相关分析CLABSI、VAP及CAUTI与导管留置时间和住院时间之间的相关性,基于 VAP患者的临床资料采用Logistic回归分析VAP的危险因素;基于细菌16S rRNA保守序列采用PCR扩增CLABSI疑似患者血标本中的细菌DNA,阳性标本通过测序决定细菌种属,并与传统血培养方法进行比较;采用REP-PCR(repetitive extragenic palindromic,基因外重复回文系列)分析VAP最常见分离菌(碳青霉烯类非敏感鲍曼不动杆菌)的同源性。   结果:   2007年9月~2008年6月共调查ICU住院患者156名,累计住院时间为1598天,中心血管导管、呼吸机通气及导尿管使用率分别为0.66、0.59、0.93,CLABSI、VAP和CAUTI的感染率2.83/患者中心血管导管日、112.36/患者呼吸机日和8.06/1000患者导尿管日。CLABSI分离菌为粪肠球菌、铜绿假单胞菌和光滑假丝酵母菌各1株;VAP分离菌以鲍曼不动杆菌最为常见,占38.14[%](74/194),它对美罗培南、亚胺培南、头孢他啶、氨苄西林/舒巴坦、头孢哌酮/舒巴坦敏感率分别为6.80[%]、14.90[%]、11.0[%]、8.5[%]和51.40[%];其次为金黄色葡萄球菌(17.53[%],34/194),其中MRSA 占87.50%;第三位为铜绿假单胞菌(12.37[%],24/194),它对美罗培南、亚胺培南、头孢他啶、环丙沙星、阿米卡星、头孢哌酮/舒巴坦以及哌拉西林/他唑巴坦敏感率为53.6%~78.6%;CAUTI分离菌以真菌居多(58%,6/13)。   导管相关性感染与导管留置时间的关系显示,CLABSI、VAP及CAUTI随导管留置时间延长而增加。直线相关性分析显示,CLABSI与导管留置时间存在相关性(r=0.79,p<0.05),与住院时间无相关性(r=0.54,p>0.05);VAP(r=0.75,p<0.05,r=0.83,p<0.01)和CAUTI(r=0.89,p<0.01,r=0.86,p<0.01)与住院时间和导管留置时间之间存在明显相关性。Logistic回归分析显示,VAP的危险因素包括呼吸机通气、呼吸系统疾病史、吸烟史、患有恶性肿瘤、经历手术及使用过镇静剂。   采用细菌16S rRNA通用引物扩增12例CLABSI疑似患者血标本中的细菌DNA,结果显示5例阳性,其中2例与血培养结果相同,3例血培养阴性而血细菌DNA检测阳性(分别为鲍曼不动杆菌、大肠埃希菌和肠杆菌属),1例血培养为光滑假丝酵母菌但血PCR细菌检测为阴性。   对VAP患者呼吸道标本分离的62株碳青霉烯类非敏感鲍曼不动杆菌进行同源性分析,得到6个基因型,分别为A 1~A2、B1-B2、C 1-C2、D1-D3、E1~E3、F 1-F44。   结论:   调查发现,我院ICU患者的导管使用率、相关性感染率和病原菌耐药率高于美国CDC监测结果。而且,VAP最常见分离菌(碳青霉烯类非敏感鲍曼不动杆菌)的同源性分析显示,ICU患者间可能存在碳青霉烯类非敏感鲍曼不动杆菌的克隆传播。因此,针对上述问题,应完善感染控制措施和抗菌药物的干预政策降低医院感染和耐药株的传播。   本实验证实,导管留置时间延长增加ICU患者获得导管相关性感染的危险。此外,患者接受呼吸机通气、手术或服用镇静剂等诊疗措施,存在呼吸系统基础疾病、患有恶性肿瘤或吸烟史亦增加其发生VAP的危险。   PCR与传统血培养法诊断CALBSI间存在差别,PCR方法表现更为灵敏,提示对于重症患者的血标本,实验室在进行传统血培养的同时,可联合采用灵敏性较高的PCR方法提高检出率,为抗菌药物合理使用提供依据。
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