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本研究以安装瘤胃瘘管及十二指肠过桥瘘管的小尾寒羊为试验动物研究了瘤胃内寡肽的产生、吸收、流通和微生物摄取规律,并用体外法研究了瘤胃壁对寡肽的吸收,旨在为生产实践中反刍动物蛋白质营养需要的研究以及新蛋白质体系的进一步完善提供一些技术依据。1 稳态代谢下瘤胃寡肽产生速度常数的估测本试验选取三只体况良好,体重 38～50kg 的 2 周岁小尾寒羊,安装瘤胃瘘管,探讨的结果表明:在连续饲喂条件下启动大豆肽灌注后,灌注24h 后瘤胃液 pH 值处于基本稳定状态,三只羊 24h 内瘤胃液 pH 值的变异系数分别为 0.85、0.85、0.80%。在此之前对瘤胃液 pH 值的检测表明,开始灌注后瘤胃液 pH 值上升,大约 4～5 小时后趋于平稳。开始灌注后瘤胃液 pH 值的上升与灌注液的 pH 值高于灌注前瘤胃液的 pH 值有关,并可能与灌注大豆肽使进入瘤胃的粗蛋白增加有关。灌注大豆肽提高了瘤胃内肽的浓度,三只绵羊瘤胃内肽的含量分别为 991.5、933.1、1064.3mg/L。灌注大豆肽前后瘤胃液游离氨基酸差异不显著(p>0.05)、总氨基酸浓度差异不显著(p>0.05)、寡肽浓度差异不显著(p>0.05),值得注意的是 2 号羊灌注大豆肽后 FAA 和 TAA 浓度均比灌注前有所下降。综合情况来看,绵羊瘤胃内 FAA、TAA、寡肽浓度在灌注前后的变化幅度均不大,在±2.9%～10.8%的范围内,说明灌注大豆肽没有对瘤胃内 FAA、TAA、寡肽的代谢状况产生太大影响。在本试验中寡肽的产生速度在 1.1g/h～2.1g/h之间,24h 的瘤胃寡肽产量在 26.4g～50.4g 之间。2 酪蛋白灌注水平对瘤胃蛋白质代谢的影响 本试验以安装瘤胃瘘管及十二指肠过桥瘘管的三只小尾寒羊为研究对象,研究了灌注不同酪蛋白灌注水平对瘤胃蛋白质代谢的影响,由结果看来随着酪蛋白灌注水平的升高瘤胃液游离氨基酸、总氨基酸和肽浓度明显升高,随后上升的速度减慢。方差分析和多重比较结果表明:不同酪蛋白灌注水平间游离氨基酸、总氨基酸和肽浓度的差异都达到了极显著水平(P<0.01)。灌注 30g 和灌注 60g 酪蛋白时瘤胃内游离氨基酸差异不显著,而其它各组之间差异显著(P<0.01)而灌注 10g 和 20g 时瘤胃内总氨基酸差异不显著(P>0.05);而各组之间肽浓度的差异均极显著(P<0.01)。 1<WP=6>绵羊瘤胃内寡肽代谢规律的研究 灌注酪蛋白显著提高了瘤胃液中 NH3-N 浓度,其中以灌注 60g 酪蛋白后瘤胃液 NH3-N 浓度最高,一号羊灌注 10g 酪蛋白与其它五组之间比较差异显著(P<0.01),而其它五组之间比较差异不显著(P>0.05);二号羊灌注 20g 和 30g 时差异不显著,灌注 40g 和 60g 时比较差异也不显著,其它各组之间比较差异显著。三号羊灌注 10g、20g、30g 之间比较差异不显著,灌注 40g、50g 差异不显著,灌注 50g、60g 差异也不显著,其它各组之间比较差异显著。 灌注酪蛋白水平对瘤胃内 MCP 浓度有明显影响。方差分析表明,不同酪蛋白灌注组间的差异显著(p<0.05)。1 号羊 MCP 浓度在灌注 40g 酪蛋白时达到峰值,之后下降,2 号羊在灌注 50g 酪蛋白时 MCP 浓度达到峰值,之后下降。多重比较表明,1 号羊 20g、30g、60g 酪蛋白灌注组间的差异不显著(p>0.05),其它各组间的差异分别达到显著或极显著水平。2 号羊 MCP 浓度在 20g、30g、60g 酪蛋白灌注组间(p>0.05),40g、50g酪蛋白灌注组间(p>0.05)和 10g、60g 酪蛋白灌注组间(p>0.05)的差异不显著,其它各组间的差异分别达到了显著或极显著水平。 十二指肠液相食糜中FAA与瘤胃液中 FAA 浓度相比随酪蛋白灌注水平变化的趋势相同,TAA、寡肽浓度与瘤胃液中相比变化趋势相反,先随灌注水平升高而升高,均在 50g 酪蛋白灌注水平时达到峰值,之后趋于下降。方差分析表明两只试羊不同酪蛋白灌注水平组间十二指肠液相食糜FAA、TAA 各灌注水平之间差异都显著(p<0.05)、寡肽浓度差异显著(p<0.05)。3 体外法直接测定绵羊消化道各组织对寡肽的吸收 各段消化道组织对寡肽的吸收不尽相同,根据吸收的各种物质的保留时间可以看出,其中前端消化道包括瘤、网、瓣、皱胃吸收的物质比较接近,后段消化道吸收的物质相同的较多,相对于前段来说吸收的各种物质也较多一些。在透过瘤胃组织的物质中检测到四种物质,两只绵羊透过的物质有两种相同,并未检测到游离氨基酸的存在。网胃透过的物质较多一点有九种,有一种与瘤胃透过的相同,其中检测到两种是氨基酸,一种是组氨酸,一种是丙氨酸,氨基酸与肽的透过率之比为 1:2.38。瓣胃也检测到通过九种物质,两只羊透过的物质差别很大,其中有两种与十二指肠透 2<WP=7>山东农业大学硕士学位论文过的是同种物质,成羊瓣胃透过氨基酸种类有谷氨酸、丝氨酸和丙氨酸,氨基酸与肽的透过率之比为 7.07:1。皱胃透过五种物质,有一种为谷氨酸,两只羊的透过率分别为 1:3.57 和 1:7.31。十二指肠只检测到四种物质,有一种与瓣胃透过的相同,另外有两种为氨基酸,分别是丝氨酸和苏氨酸,氨基酸与肽的透过率之比为 1:2.13。空肠透过 9 种物质,两只羊透过的四种物质是同种物质,其中有四种为氨基酸,分别是谷氨酸、丝氨酸、甘?