表皮葡萄球菌(以下简称表葡菌)是人体皮肤和粘膜上定居的正常菌群之一,通常情况下致病力很低.然而十余年来,随着留置静脉导管等医疗装置应用和侵入性操作的增多,该菌已成为医院感染的重要病原菌.尤其是在异物植入相关性感染如留置静脉导管、脑脊液分流、人工骨关节置换和心脏瓣膜置换术后等引起的感染中,表葡菌已经成为最常见的病原菌.近年来已发现表葡菌致病力的强弱与其进入人体后对组织或异物的粘附力密切有关,该类细菌进入人体后先定植并分泌大量粘液,形成粘液层,此粘液层保护细菌不受抗菌药物的作用,并降低细胞的吞噬功能,减弱补体的调理功能,致使表葡菌感染难以治愈.近期国外在表葡菌中发现了一个新的基因,该基因与纤维蛋白原的结合密切相关,被称为纤维蛋白原结合基因(The gene for fibrinogen-binding protein,fbe基因),它编码一种和纤维蛋白原结合的蛋白质,含有该基因的菌株体外粘附能力强.然而该基因在表葡菌感染发病机制中的作用并不清楚.当前发达国家都在积极利用分子生物学技术对病原微生物的基因组进行测序,而对基因功能的研究相对滞后,对该基因致病功能的研究亦未见报道,据推测该基因在表葡菌的定植、粘附等过程中可能起重要作用.如能阐明fbe基因在表葡菌感染中的致病功能及其作用方式将对控制表葡菌感染具有重要意义.基于上述情况,该研究将对表葡菌fbe基因在致感染中的作用进行研究,通过基因插入灭活技术破坏fbe基因,获得fbe基因缺失型菌株,并对原始菌株和人工变异菌株的fbe基因的mRNA转录水平和体外与纤维蛋白原(Fg)的的结合能力进行测定比较,有望初步阐明fbe基因在表葡菌致异物感染中可能是重要的因素之一,可能发现预防及治疗表葡菌感染的重要线索.1.表葡菌fbe基因的检测和测序.收集101株表葡菌临床分离株和34株其他类型葡萄球菌(包括金黄色葡萄球菌、溶血葡萄球菌、人葡萄球菌等)以及54株正常人表皮寄殖株,通过聚合酶链反应(PCR)检测葡萄球菌中fbe基因的检出率及其分布并比较.2.表葡菌fbe基因功能的研究.为阐明fbe基因在表葡菌在致异物感染中的作用,我们构建了fbe基因缺失型菌株,继而测定其fbe基因功能的表达能力.