【摘 要】
：
该论文以米曲霉Aspergillus oryzae的总DNA为模板,PCR扩增了单宁酶基因(tan),并分别尝试了利用大肠杆菌(Escherichia coli)和巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)进行表达.将单
论文部分内容阅读
该论文以米曲霉Aspergillus oryzae的总DNA为模板,PCR扩增了单宁酶基因(tan),并分别尝试了利用大肠杆菌(Escherichia coli)和巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)进行表达.将单宁酶基因 tan重组到trc启动子控制下的表达载体pSE380中,并分别转化入大肠杆菌DH5α,Top10,BL21(DE3)三种重组表达菌株中.经1mmol/L异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导12小时后,经过没食子酸丙酯紫外分光光度法测定,表明表达产物具有单宁酶活性,三个重组菌株的最高酶活力分别为65.50U/ml,61.02U/ml以及100.89U/ml.SDS-PAGE分析表明,在63KD处有明显的蛋白质特征带.将单宁酶基因tan重组到巴斯德毕赤酵母AOX基因启动子控制下的表达载体pPIC9k中,得到重组质粒pPIC9k-tan,转化到Pichia pastorisGS115菌株中,重组菌株经甲醇培养基诱导表达后,检测发酵液及菌体细胞中单宁酶酶活,与对照菌株相比,未发现明显活力.SDS-PAGE检测也未发现明显的特征带.
其他文献
辣椒（Capsium annuum）是农业生产上的大宗蔬菜之一，“六五”、“七五”、“八五”期间，我国把辣（甜）椒抗病新品种的选育作为重点攻关项目。为害辣椒地上部分的害虫有烟青虫，属于鳞翅
目的 研究给予多囊卵巢综合征患者桂枝茯苓胶囊与炔雌醇环丙孕酮联合治疗的应用效果.方法 选取我院118例多囊卵巢综合征患者,依据治疗方案不同分组,各59例.对照组单纯采用炔
目的 研究米非司酮联合腹腔镜下子宫内膜异位囊肿的治疗效果.方法 选取我院子宫内膜异位囊肿患者64例分为两组,腹腔镜组实施腹腔镜下手术治疗,联合组实施米非司酮联合腹腔镜
在新三板市场扩容问题广受关注之际,记者采访了新近在新三板挂牌的两家公司北京北方永邦科技股份有限公司(以下简称永邦科技)和北京国学时代文化传播股份有
The expansion o
目的 探究参附注射液与卡维地洛联合治疗应用于慢性心力衰竭(CHF)患者的价值.方法 选取我院慢性心力衰竭(CHF)患者108例,根据治疗方案不同分为研究组和参照组,参照组予以卡维
该实验室将曲细精管分段分离与DDRT-PCR技术结合,筛选、克隆、鉴定精子发生过程中阶段特异性表达基因,RSD-3即是其中获得的一条新的全长cDNA,该基因全长2228bp,开放阅读框编
目的 探究戈舍瑞林预处理联合腹腔镜手术治疗子宫体积≥14孕周子宫肌瘤患者的疗效.方法 选取我院102例子宫体积≥14孕周子宫肌瘤患者,按治疗方案不同分组,各51例.对照组给予
随着通信系统的不断发展，对天线带宽、方向图等特性都有很高的要求。而印刷振子天线又以体积小、结构简单等特点成为研究热点。论文以宽频带微带振子天线为研究对象，进行了数值
目的 分析银杏叶提取物注射液辅助治疗急性脑梗死的疗效.方法 选取我院急性脑梗死患者77例(2016年7月～2018年6月),抽签法分组,参照组38例予以依达拉奉治疗,试验组39例在对照组
生物磁感应效应普遍存在，由于缺乏对磁场的生物学作用机制的了解，目前磁场生物学效应的科学证据十分不足。本研究基于近年来已在迁徙动物中证实的蓝光介导的隐花色素蛋白作为磁