假单胞菌中乐果降解酶的纯化及其特性的研究

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从农药长期污染的土样中分离到一株铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)P-1,该菌株可以利用乐果为唯一碳源和能源进行生长,生长的最适pH为7.0-7.5,最适温度为30℃-35℃.在组份为0.3%蛋白胨,0.05%牛肉膏,0.05%乐果,0.5%NaCl的培养基中摇床(35℃,150rpm)培养24小时,可产生最高的乐果降解酶活性,达到约6u/ml.该酶乐果降解的最适反应pH为8.0,最适温度为65℃.在pH5.0-9.0的范围内以及在90℃处理半小时均表现稳定.通过硫酸铵沉淀、凝胶过滤、离子交换柱层析等多步纯化,降解酶比活达到146.8u/ml,纯化了28.2倍,回收率为30.6%.经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定,该降解酶的分子量约为56KD.
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