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毛细管电泳（Capillary electrophoresis，CE）又称高效毛细管电泳(HPCE)，是一类以毛细管为分离通道、以高压电场为驱动力的液相分离技术。CE不仅具有高效、快速、微量和灵活等优点，而且十分经济环保，故已被广泛应用于各种研究领域，小至阴阳离子大到细胞蛋白均可以用其进行检测。然而，由于毛细管受到内径较小的限制，检测灵敏度是CE系统最突出的问题。特别是对于紫外检测器(UV)，由于灵敏度低，严重影响了CE在痕量样品检测中的应用。目前虽然已有多种高灵敏度检测器可用于提高CE检测灵敏度，但由于效果有限，且部分检测器价格较高难以普及，因此样品富集技术仍是解决CE检测灵敏度问题较为经济、有效的方法。由于每种富集技术都有一定的适用范围和应用对象，因此单独使用某一种在线富集技术，不仅检测灵敏度提高有限，同时应用范围也受到了一定限制。为了建立快速、高效、准确、高灵敏度和普适性的检测方法，本项研究根据目标样品复杂性，将多种毛细管在线富集技术与其他分离方法或富集技术联用并进行优化，成功实现了对食品添加剂三聚氰胺、手性药物β-阻滞剂以及细胞自噬标记物的快速、高效、准确和高灵敏度的检测。 1.基于CE技术的牛奶中三聚氰胺及其衍生物的高灵敏度检测: 在本部分工作中，联用了多种CE在线富集技术。首先运用LVSS-Sweeping富集技术实现了对三聚氰胺(MM)、三聚氰酸二酰胺(AMN)、三聚氰酸一酰胺（AMD）和三聚氰酸(CA)的分离与检测。为了进一步提高方法的检测灵敏度，采用阳离子选择性耗尽进样-扫集法(CSEI-S)和阴离子选择性耗尽进样-扫集法(ASEI-S)分别对MM/AMN和CA/AMD进行样品富集。最终，利用多种在线富集方法的联用，本工作实现了对MM、AMN、AMD和CA的简单、快速分离以及高灵敏度检测。采用CESI-S在10分钟内即可完成MM/AMN的分离与检测，二者检测限均为0.01 ng/mL（三倍信噪比）。采用ASEI-S对CA/AMD进行分离，8分钟内可以检测完毕，分别获得0.05 ng/mL与0.1 ng/mL的低检测限。 2.基于CE技术的三种手性药物β-阻滞剂的手性分离与高灵敏度检测: 在本部分工作中，通过在缓冲溶液中加入非手性离子液体2，3-环氧丙基三甲基氯化铵，与手性选择试剂三甲基-β-环糊精和二甲基-β-环糊精共同作用，成功实现了对三种β-阻滞剂，心得安、心得静和心得平的手性分离。同时，作者还对三种手性选择试剂的协同作用进行了研究，并将毛细管电泳在线富集技术FESI与上述多元手性拆分技术联用，实现了对尿液样本中的三种β-阻滞剂的快速、高效手性分离以及高灵敏度检测。该方法检测限可达0.10 nM。 3.基于CE技术的细胞自噬相关生物问题研究: 在本部分工作中，首先为了能够实现监测外源性细胞自噬的活性，作者研究、建立了一种简单、快速、定量的MEKC-LIF方法，用于直接检测外源性自噬标记蛋白GFP-LC3，并将该方法应用于饥饿和氯喹处理过的细胞样品的自噬活性监测中。随后为了实现对内源性细胞自噬标记物的检测，引入了一种在线荧光衍生化方法，并将该方法与在线富集技术FESI联用，大大提高了方法的检测灵敏度，其检测限可达0.48 ppt（牛血清蛋白作为标准样品）。这种方便、简单、高效以及高灵敏度的检测方法将有望实现内源性细胞自噬的检测。 4.基于CE技术的反式脂肪酸的检测: 本部分工作的目的是尝试利用CE-UV，实现对反式脂肪酸(TFA)高灵敏检测。由于大部分脂肪酸(FA)为含有长链烯烃的羧酸，无紫外吸收。为了实现对FA的UV检测，首先利用高效液相色谱(HPLC)紫外衍生化方法对三种TFA样品进行修饰。同时希望通过加入环糊精等添加剂，实现对FA的顺反分离，以期实现对实际样品中TFA的检测。并将紫外衍生化方法与毛细管电泳在线富集技术联用，以便实现TFA的高灵敏度检测。