【摘 要】
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第一部分中华眼镜蛇毒活性组分抑内皮细胞增殖的作用目的:观察中华眼镜蛇毒活性组分(Naja najaAtra venom active factor,NNAVAF)对内皮细胞增殖的选择性抑制作用.方法:采用
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第一部分中华眼镜蛇毒活性组分抑内皮细胞增殖的作用目的:观察中华眼镜蛇毒活性组分(Naja najaAtra venom active factor,NNAVAF)对内皮细胞增殖的选择性抑制作用.方法:采用倒置显微镜、酶标仪分析不同浓度NNAVAF对人脐静脉内皮细胞系ECV304生长增殖的影响;分析不同浓度NNAVAF作用下人脐静脉内皮细胞系ECV304、SD大鼠平滑肌细胞(SMC)、人胚肺成纤维细胞HLF以及人支气管上皮细胞HBE生长增殖的变化;并运用直线回归分析统计对比NNAVAF对上述各细胞的IC50.结论:NNAVAF对内皮细胞的生长和增殖具有选择性抑制作用,抑制内皮细胞的生长增殖明显优于对平滑肌细胞、成纤维细胞及上皮细胞等其它细胞的抑制作用,这在影响血管生成中可能具有一定的意义.第二部分中华眼镜蛇毒活性组分诱导内皮细胞凋亡目的:观察NNAVAF诱导内皮细胞凋亡的作用方法:采用荧光显微镜、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪等方法检测不同浓度的NNAVAF对人脐静脉内皮细胞系ECV304凋亡形态学、DNA、细胞周期以及凋亡指数的影响.结论:NNAVAF能够诱导内皮细胞出现凋亡,可能通过此途径抑制内皮细胞的生长增殖,从而对抗血管的生成.第三部分中华眼镜蛇毒活性组分诱导内皮细胞凋亡的机制探讨目的:探讨NNAVAF诱导内皮细胞凋亡的可能机制方法:采用流式细胞仪、紫外分光光度计、酶标仪等检测NNAVAF作用后人脐静脉内皮细胞系ECV304 Bcl-2、caspase3等相关蛋白的表达.结论:NNAVAF可以诱导内皮细胞凋亡,其作用机制可能与其上调caspase3的活性有关,而与Bcl-2蛋白的表达水平无显著关系.
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