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洛克沙胂是国内外广泛使用的一种有机胂饲料添加剂,近来的研究表明其能促进人血管内皮细胞生长,存在着促血管生成作用及潜在的致癌风险。血管内皮生长因子(VEGF)是目前已知的最重要的血管生长调节因子。目前国内外有关洛克沙胂促血管生成作用及其VEGF的调控研究还基本是空白。本研究拟通过基质胶塞血管生长模型、对内皮细胞的生长影响来研究洛克沙胂体内外促血管生长作用及对VEGF表达的影响,为探讨洛克沙胂可能的特殊毒性及潜在的致癌风险研究积累基本资料,也为洛克沙肿作为饲料添加剂在畜禽生产中使用安全性的研究有积极意义。基质胶塞模型实验中,剂量设置分别为洛克沙胂0.10μM、1.00μM、10.00μM、10ng/mL采用VEGF为阳性对照,PBS为阴性对照。内皮细胞经过不同的处理后注射于ICR小鼠的皮下,10天后检测形成胶塞的体积、重量及血红蛋白的含量。结果表明,洛克沙肿处理各组胶塞体积、重量及血红蛋白含量均明显大于PBS对照组(P<0.05)；洛克沙胂在0.10μM～1.00μM范围内,随剂量增加基质胶塞体积、重量和血红蛋白的含量随之升高,但10.00μM洛克沙胂剂量组胶塞的体积、重量和血红蛋白的含量反而减小,且均小于1.00μM。1.0μM洛克沙胂组的血红蛋白含量与VEGF组相当。大鼠内皮细胞培养试验中,剂量组分别为10.00μM、1.00μM、0.10μM、0.01洛克沙胂,1.00μM+Anti-FLT、1.00μ+Anti-KDR,及Anti-FLT、Anti-KDR、Anti-VEGF和PBS对照组。内皮细胞培养6h后,MTT法检测细胞的活力；ELISA法检测培养上清中VEGF的量;Werstern Blot检测细胞中VEGF的表达。管形成试验评价洛克沙胂形成血管的能力。MTT的结果表明,0.10～10.00μM洛克沙胂处理及VEGF组细胞活力显著高于PBS对照(P<0.05),1.00μM组OD值最高；1.00μM+Anti-KDR组显著低于1.00μM(P<0.05)；1.00μM+Anti-FLT组与1.00μM组无显著差异(P>0.05); Anti-KDR和Anti-VEGF组显著低于PBS对照(P<0.05),而Anti-FLT与PBS无显著差异(P>0.05)。结果表明洛克沙胂具有明显的促内皮细胞生长的作用,且1.00μM促生长能力最强；洛克沙胂促内皮细胞生长明显与VEGF、KDR有关。内皮细胞管形成试验中,0.01μM、0.10μM、1.00μM、10.00μM洛克沙胂处理组形成的管数显著高于PBS对照组；0.01～1.0μM范围内,随剂量增加形成的管数增加,1.000M组最高,10.00μM组反而减少。内皮细胞不同处理后培养上清中VEGF含量测定表明,0.10μM、1.00μM、10.00μM洛克沙胂组显著高于PBS对照组(P<0.05),且1.0μM组最高；1.00μM+Anti-KDR组显著高于1.00μM组(P<0.05);1.00μM+Anti-FLT组与1.00μM组无显著差异(P>0.05)；而Anti-KDR和Anti-FLT分别低于1.00μM+Anti-KDR和1.00μM+Anti-FLT组。表明洛克沙胂可刺激内皮细胞分泌VEGF,阻断受体FLT对细胞上清中VEGF的浓度无明显影响,而KDR阻断后使培养液中VEGF的浓度明显上升。Western Blot检测表明0.10μM、1.00μM、10.00μM洛克沙胂组的VEGF表达均显著高于PBS对照,且1.00μM组表达最强。综上所述,洛克沙胂在0.1～10.00μM范围内有明显的促血管生长作用,1.00μM剂量时作用最强,且VEGF和KDR在洛克沙胂促血管生成中具有调节作用。