[目的]本试验通过在延边黄牛耳成纤维细胞体外培养液中分别添加中药成分淫羊藿苷、小檗碱和川芎嗪来验证其对延边黄牛耳成纤维细胞活力和氧化修复的影响,确定中药成分提高延边黄牛耳成纤维细胞活力的最佳浓度及评估其对氧化损伤细胞修复能力。为改进延边黄牛耳成纤维细胞在延边黄牛体细胞克隆中的应用和日后延边黄牛的保种工作提供技术支持。[方法]1.体外培养延边黄牛耳成纤维细胞至第四代后,在DMEM培养液中分别添加不同浓度的淫羊藿苷、小檗碱和川芎嗪,培养24、48、72、96小时后,用MTT法测出细胞活力并对所有数据进行统计分析,筛选出最佳浓度。2.在DMEM培养液中同时添加两种最佳浓度中药成分,培养96h后,用MTT法测出细胞活力并对所有数据进行统计分析。3.氧化损伤的延边黄牛耳成纤维细胞中分别添加最佳浓度的淫羊藿苷、小檗碱和川芎嗪,培养96h后,用MTT法测出细胞活力,对所有数据进行统计分析后与细胞的对照组和自我修复组作比较,评估它们的氧化修复能力。[结果]1.在淫羊藿苷对牛耳成纤维细胞的影响试验中,淫羊藿苷试验组均能提高延边黄牛耳成纤维细胞的活力。淫羊藿苷浓度范围在0.001μg/ml～0.1μg/ml的细胞培养到72h后,细胞活力均显著高于对照组。其中,浓度为0.001pg/ml提高细胞活力效果最好。2.在小檗碱对牛耳成纤维细胞的影响试验中,小檗碱浓度范围在0.01μmol/L～1μmol/L均能提高延边黄牛耳成纤维细胞活力,而且培养到72h后细胞活力均显著高于对照组。其中,浓度为1μmol/L提高细胞活力效果最好。3.在川芎嗪对牛耳成纤维细胞的影响试验中,川芎嗪浓度范围在25μ/ml～50μ/ml均能够提高延边黄牛耳成纤维细胞活力。其中,浓度为50μg/ml提高细胞活力效果最好,细胞培养到72h后细胞活力显著高于对照组。4.在中药成分联合作用对延边黄牛耳成纤维的影响试验中,川芎嗪和小檗碱试验组、小檗碱和淫羊藿苷试验组抑制了延边黄牛耳成纤维细胞的活力,而川芎嗪和淫羊藿苷试验组能提高延边黄牛耳成纤维细胞的活力,但与对照组不存在显著差异。5.在淫羊藿苷对延边黄牛耳成纤维细胞氧化损伤的修复试验中,淫羊藿苷修复组的细胞活力与自我修复组相比差异性显著,而对照组的细胞活力比淫羊藿苷修复组高,但差异性不显著。结果表明：淫羊藿苷具有氧化修复能力。6.在小檗碱对延边黄牛耳成纤维细胞氧化损伤的修复试验中,小檗碱修复组的细胞活力与自我修复组相比差异性显著。对照组的细胞活力比小檗碱修复组高而且差异性显著。结果表明：小檗碱具有氧化修复能力。7.在川芎嗪对延边黄牛耳成纤维细胞氧化损伤的修复试验中,川芎嗪修复组的细胞活力与自我修复组相比差异性显著。对照组的细胞活力比川芎嗪修复组高而且差异性显著。结果表明：川芎嗪具有氧化修复能力。