皮肤癌是人类最常见的恶性肿瘤之一,其诱发的主要因素是紫外线辐射。紫外线辐射造成细胞的DNA损伤,是诱发皮肤癌的基础;而执行DNA的损伤修复,维持基因组完整性,控制细胞信号传导,调控细胞增殖、分化和凋亡的重要基因和信号通路,是皮肤癌发生的关键。其中,据文献报道,JAK-STAT信号通路对DNA损伤修复具有重要作用。论文主要围绕皮肤癌A431细胞在UV辐射引起的DNA损伤下,研究JAK-STAT信号通路的损伤修复的调控机制。论文研究皮肤癌A431细胞在UV照射引起的DNA损伤条件下,JAK-STAT与DNA损伤的关系。在皮肤癌A431细胞中建立UV辐射引起的DNA损伤模型,即通过不同剂量的UV辐射,采用彗星实验、脉冲场凝胶电泳和平板克隆细胞形成实验检测细胞的基因组损伤程度和增殖能力,摸索合适的UV辐射剂量从而建立该模型。在构建的DNA损伤模型的基础上转染STAT3表达质粒,利用彗星实验、脉冲场凝胶电泳和平板克隆细胞形成实验检测DNA损伤的情况,结果表明STAT3能够降低细胞对UV损伤的敏感性,并且能够提高细胞的增殖能力。接下来利用RT-PCR、Western Blot技术分别从mRNA、蛋白水平检测抗凋亡基因Bcl-2以及细胞周期蛋白CCND1的表达情况,结果表明STAT3能够抑制凋亡,利用TUNEL法同样也证明了 JAK-STAT信号通路能够抑制损伤细胞的凋亡。因此得出结论JAK-STAT信号通路可以抑制皮肤癌A431细胞的UV损伤,抑制损伤细胞的凋亡并促进增殖。进一步探索JAK-STAT信号通路对DNA损伤的修复影响。首先利用RT-PCR、Western Blot、荧光素酶报告基因活性检测法检测DNA修复通路的关键基因ATM和ATR的表达,其次用同样的方法检测DNA修复的标志性基因的表达,结果证明JAK-STAT信号通路可以上调ATR及DNA损伤的关键修复基因的表达。利用RT-PCR检测miR-383对DNA损伤的标志修复基因的转录的影响,并利用RT-PCR、Western Blot、荧光素酶报告基因活性检测法检测miR-383对ATR的调控作用,结果表明ATR是miR-383直接调控的靶蛋白,miR-383抑制ATR的转录和调控。上述研究证明STAT3与miR-383均调控ATR,为研究两者之间联系,构建miR-383启动子的荧光素酶报告基因质粒,利用荧光素酶活性检测技术证明了 STAT3抑制miR-383启动子的转录。综上所述,论文在对UV诱导的皮肤癌细胞的研究中发现,JAK-STAT信号通路能够促进DNA损伤的修复,而这种调控的可能机制是STAT3抑制miR-383启动子的转录,从而抑制miR-383对ATR的负调控作用。论文的结果为JAK-STAT信号通路在DNA损伤修复中的作用机制提供了线索,也为今后深入探讨皮肤癌等相关肿瘤的DNA损伤和修复提供了新的理论指导。