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莱姆病是一种经蜱传播,由伯氏疏螺旋体(Borrelia burgdorferi)也称莱姆病螺旋体(Lyme disease spirochaete)感染机体而引起的全身多系统受损的感染性疾病。莱姆病是一种重要的自然疫源性疾病,也是一种人兽共患病,该病在世界范围内分布广泛,世界五大洲的七十多个国家都有莱姆病的病例报告。在我国现已证实有29个省(自治区、直辖市)的人群中存在莱姆病螺旋体的感染,莱姆病的自然疫源地几乎遍布我国所有山林地区。我国受莱姆病威胁的人群接近1亿,估计我国莱姆病的每年新发病例不少于2万例。目前,绝大部分莱姆病患者得不到明确的诊断和有效的治疗,40%~50%转为中、晚期病例,长期反复发作,后果严重。
为了解我国莱姆病的流行情况,2006年,用分层随机抽样的方法在中国吉林省、山西省、甘肃省、青海省、贵州省、湖南省六省各选取一个代表性调查点(其中贵州省选了两个点)进行了调查。采用统一的调查方案系统收集调查点的人群流行病学资料进行分析,并采集血清标本、媒介蜱类和主要宿主动物鼠类脏器标本;采用间接免疫荧光抗体实验(IFA)进行人群莱姆病螺旋体抗体检测;用PCR方法和病原分离培养方法对媒介蜱和宿主动物鼠类进行病原学调查。菌株鉴定采用种属特异的单克隆抗体(H5332、H6831和H9724)用IFA方法进行鉴定。
通过IFA检测,六省人群血清抗莱姆病螺旋体抗体(IgG)平均阳性率为9.84%,不同地区的人群莱姆病感染率有显著差别,其中吉林省长白县12.04%、山西省垣曲县0.93%、甘肃省迭部县10.92%、青海省互助县21.61%、贵州省道真县9.36%、威宁县5.43%、湖南省浏阳市8.40%。并且有蜱叮咬史者血清抗体(IgG)平均阳性率为65.98%,没有蜱叮咬史者血清抗体(IgG)平均阳性率为1.37%,其差异有统计学意义。
通过PCR方法检测,六省蜱标本的阳性率分别为吉林省长白县27.08%、山西省垣曲县4.72%、甘肃省迭部县14.62%、青海省互助县23.93%、贵州省道真县33.71%、湖南省浏阳市11.94%;经统计学检验,其差异有统计学意义。六省鼠类标本PCR检测阳性率分别为吉林省长白县6.90%、山西省交城县8.93%、甘肃省迭部县7.25%、青海省互助县12.0%、贵州省未检出阳性、湖南省浏阳市8.70%。经统计学检验,无显著性差异。
为了验证PCR结果,从每个省蜱和鼠的PCR阳性产物中随机挑选一份送公司测序。序列经美国国立生物技术信息中心(NCBI)比对,结果显示,六省蜱的基因型:贵州和湖南的基因型为Borrelia valaisiana;吉林、青海、甘肃和山西的基因型均为Borrelia garinii。鼠的基因型:湖南的基因型为Borrelia valaisiana;吉林、青海、甘肃和山西的基因型均为Borrelia garinii。
采用BSKII培养基从吉林的400只全沟硬蜱中分离获得9株莱姆病螺旋体,鼠标本中分离到4株莱姆病螺旋体(从褐家鼠脾脏得到2株、褐家鼠肾脏得到1株、黑线姬鼠肾脏得到1株);从贵州省400只二棘血蜱标本中分离到10株莱姆病螺旋体。经过种属特异的单克隆抗体(H5332、H6831和H9724)鉴定均为莱姆病螺旋体。
此次调查结果显示六省人群均不同程度存在莱姆病螺旋体的感染,并且有蜱叮咬史者血清抗莱姆病螺旋体抗体(IgG)阳性率要显著高于无蜱叮咬者,说明人群的莱姆病感染率与蜱叮咬机率有关。
此次调查还发现六省的优势蜱种不同,吉林省长白县和青海省互助县以全沟硬蜱为优势蜱、甘肃省迭部县、贵州省道真县、湖南省浏阳市以二棘血蜱为优势蜱、山西省垣曲县以长角血蜱为优势蜱。其中吉林、青海、贵州的蜱标本PCR检出阳性率明显高于其他三省,说明吉林、青海、贵州蜱的带菌率比较高。