斜纹夜蛾蜕皮激素受体(EcR/USP)与热激蛋白分子70(Hsp/Hsc70)相互作用研究

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蜕皮激素受体二聚体(EcR/USP)在昆虫变态发育过程中起着至关重要的调控作用。研究表明EcR/USP只有与热激蛋白(Heat shock protein,Hsp)分子伴侣作用以后才能获得DNA结合能力,参与其它基因的转录调控。为了明确EcR/USP与HSP/HSC70间的蛋白相互作用,我们以一种重要蔬菜害虫——斜纹夜蛾为研究对象,利用CO-IP和LC/MS的方法发现HSP/HSC70与EcRA/EcRB1之间存在蛋白相互作用。为进一步明确两两间的蛋白互作关系,。我们利用原核细胞分别表达了EcRA、EcRB1、USP1、USP2的融合蛋白,采用Pull-down、Western blot、Farwestern等方法发现HSP70和HSC70能够分别与EcRA、EcRB1、USP1和USP2产生蛋白质相互作用。为进一步探究这种蛋白质互作对EcR/USP功能的影响,我们采用细胞转染和免疫组化的方法,应用激光共聚焦显微镜研究了这些蛋白质在正常情况以及在20E诱导情况下的亚细胞定位情况。结果表明,正常情况下,Hsp70主要定位于细胞质中,而EcRB1、USP1和USP2主要定位于细胞核中。在20E诱导下,Hsp70进入细胞核中,EcRB1和USP1在细胞核中的表达量均有所上调。这些结果表明,Hsp70分子伴侣与蜕皮激素受体的蛋白相互作用很可能有利于后者在20E诱导下向细胞核聚集,从而激活20E信号通路,对变态发育产生调控。
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