小肠移植是治疗不可逆性肠衰竭的唯一根本有效方法。但由于解剖、生理等方面的独特性，小肠移植较之其它脏器如肝、肾等难度更大。影响小肠移植结果的因素包括排斥反应、移植物抗宿主病(graft-versus-host，GVHD)、原发性移植肠无功能以及感染等。上世纪80年代CsA和FK506的应用使得小肠移植在临床获得成功。随着新型免疫抑制剂的开发和临床应用，小肠移植术后排斥反应的控制将会有更多、更有效的方法。 在小肠移植过程中，移植肠不可避免要经历缺血、缺氧、保存、再灌注等过程和损伤，并出现一系列结构和功能的改变，如肠黏膜水肿、上皮脱落和等。研究证实多种药物均有促进术后移植肠结构和功能恢复的作用，但是相对于移植肠所经受的缺血再灌注损伤、排斥反应等而言效果十分有限，且具有滞后性。如果能采取措施使供肠在获取前即获得抵抗随后的缺血再灌注及其它损伤的能力，必将能减轻术后移植肠结构和功能的改变，减少术后并发症的发生，提高小肠移植的效果。热休克反应是细胞对各种不利因素刺激所表现的一种以基因表达和调控方面发生改变为特征生理的反应。在这种反应过程中，转录和翻译合成某些蛋白的基因被关闭，而热休克蛋白基因打开，产生一组热休克蛋白，又称应激蛋白(stressprotein，SP)。后来的研究发现高温、缺氧、再灌注局部损伤或感染等多种有害因素刺激均可产生热休克蛋白。研究表明热休克蛋白可以减轻移植肠冷保存损伤和小肠热缺血再灌注损伤。 本研究建立了大鼠异位全小肠移植模型，在此基础上观察了精氨酸诱导热休克蛋白合成的规律，研究了热休克蛋白对移植肠缺血再灌注损伤的影响，并对其作用机制作初步探讨。 第一部分大鼠异位全小肠移植模型的建立 本研究的目的是建立稳定可靠的大鼠异位全小肠移植模型。 选用近交系Wistar大鼠作供、受体。参照张小桥博士的方法，并加以改进，行供肠肠系膜上动脉-受体腹主动脉端侧、供肠门静脉-受体左肾静脉端端套管吻合的异位全小肠移植术。 结果：共进行300次大鼠异位全小肠移植手术。其中预实验阶段行248次，手术成功率34％。正式实验52次，手术成功率92％。 结论：我们采用的大鼠小肠移植方法简单、可靠，可以建立稳定的小肠移植模型，满足后继实验的要求。 第二部分精氨酸对大鼠小肠热休克蛋白表达的影响 本研究的目的是了解精氨酸能否诱导大鼠小肠合成热休克蛋白，以及精氨酸注射后大鼠小肠热休克蛋白的表达规律。 采用第一部分建立的大鼠异位全小肠移植模型。按供肠获取方法手术，在移植肠标本获取前不同时间点给予精氨酸静脉注射，剂量为50mg/kg体重。在移植肠获取时留取标本，用RT-PCR、蛋白免疫印迹和免疫组化法分别检测热休克蛋白或HSP72mRNA和蛋白质。 结果发现，精氨酸注射后5分钟即有较高水平的热休克蛋白HSP72mRNA，而其蛋白质合成则较晚，精氨酸静脉注射90分钟后才有热休克蛋白表达。免疫组化发现热休克蛋白定位于细胞核上方的高氏区。 结论：精氨酸静脉注射可以诱导大鼠小肠粘膜上皮细胞合成热休克蛋白。 第三部分精氨酸诱导热休克蛋白合成对移植肠缺血再灌注损伤的影响 本研究的目的是了解精氨酸诱导热休克蛋白合成能否减轻移植肠缺血再灌注损伤。 根据第二部分实验结果，于移植肠获取前0分钟、5分钟和90分钟静脉注射精氨酸以诱导热休克蛋白合成。移植肠简单冷保存8小时后按第一部分模型行近交系大鼠异位全小肠移植，术后15分钟取标本观察形态学改变并评分，同时观察动物术后2周存活率。 结果发现，90分钟组动物术后2周全部存活，而其它两组动物术后2周存活率为0。90分钟组病理组织学评分也明显好于0分钟和5分钟组。 结论：精氨酸诱导热休克蛋白合成可以减轻缺血再灌注导致的移植肠组织学损伤，提高移植术后动物的存活率。 第四部分精氨酸诱导热休克蛋白合成对小肠缺血再灌注损伤保护作用的机制研究 本研究目的是探讨热休克蛋白对移植肠缺血再灌注损伤保护作用的机制。 按移植肠获取前注射精氨酸的时间分成0、5、90分钟组，供肠简单冷保存小时后留取部分标本供检测一氧化氮含量。移植后15分钟再次取移植肠标本，用于检测丙二醛、髓过氧化酶、细胞凋亡。 结果发现，简单冷保存8小时后各组移植肠一氧化氮含量无显著差异。再灌注15分钟后移植肠丙二醛、髓过氧化酶含量较正常小肠明显升高，肠粘膜上皮细胞细胞凋亡加重。但是热休克蛋白表达可以减轻上述改变。 结论：热休克蛋白对移植肠缺血再灌注损伤的保护作用与减轻脂质过氧化、抑制中性粒细胞在微血管床积聚和抗细胞凋亡有关。