黑褐举腹蚁（Crematogaster rogenhoferi）是橡胶树害虫橡副珠蜡蚧的捕食性天敌优势种之一,在田间黑褐举腹蚁凭嗅觉感受识别搜索橡副珠蜡蚧,捕食其1龄若虫,对橡副珠蜡蚧的种群数量有较好的控制作用。嗅觉对膜翅目昆虫觅食、繁衍等活动中发挥重要作用。但黑褐举腹蚁气味结合蛋白的具体功能尚不明确,黑褐举腹蚁相关蛋白基因的鉴定及功能分析有助于嗅觉机制的研究。本文构建了黑褐举腹蚁触角转录组,利用CrogOBPs基因的时空表达,行为研究,基因克隆,重组表达载体的构建,重组蛋白原核表达与纯化,结果如下:1.黑褐举腹蚁的嗅觉行为试验和触角电生理试验结果表明18种橡副珠蜡蚧挥发物中黑褐举腹蚁对十六烷的选择反应率最高,其次是十五烷、芘、3,5-二叔丁基-4-羟基苯甲醛,均对黑褐举腹蚁有引诱作用。苯并噻唑、十四酸异丙酯、己烷雌酚对黑褐举腹蚁具有趋避作用。不同质量浓度的化合物标准品对黑褐举腹蚁的引诱程度不同,在0.10mg/mL的质量浓度下十六烷、十五烷引诱效果最佳。2.用HiSeq X-ten高通量测序平台对黑褐举腹蚁触角进行转录组测序,共获得53,892条Unigene,平均长度904.02 bp。在NR数据库中注释的基因在所有注释数据库中最多,为16,074条（99.31%）,与埃氏扁胸切叶蚁（Vollenhovia emeryi）相似度最高,为3,214条（20.00%）。对KOG数据库的unigenes对其可能的功能进行了预测,在26个KOG类别中,“一般功能预测”的组类最大（383,13.85%）。其次是“翻译、核糖体结构与生物发生”组（325,11.75%）。通过转录组数据分析,鉴定到4个气味结合蛋白,此外还鉴定到感觉神经元膜蛋白3个、化学感受蛋白3个、嗅觉受体37个、离子型受体2个。3.对黑褐举腹蚁CrogOBPs进行基因克隆和测序分析,4个OBP都具有完整的开放阅读框,拥有6个保守的半胱氨酸残基,属于典型气味结合蛋白,在N端有17-23个氨基酸组成的信号肽。4.通过荧光定量RT-PCR检测黑褐举腹蚁CrogOBPs基因在不同组织中的表达差异分析,结果表明CrogOBPs基因在黑褐举腹蚁触角中的表达量显著高于其他组织,推测在触角中高表达量OBP在黑褐举腹蚁嗅觉功能中起着重要作用。5.利用原核表达系统成功表达了 1个OBP蛋白。成功构建了重组质粒pET-30a（+）-CrogOBP3,重组蛋白 pET-30a（+）-CrogOBP3 表达条件为:温度 30℃,IPTG终浓度0.5mmoL/L,时间6h,该蛋白以包涵体的形式表达,经过包涵体变复性、采用His标签亲和层析柱对重组蛋白进行了纯化。黑褐举腹蚁重组蛋白CrogOBP3在200mmoL/L的咪唑浓度下可以得到目的蛋白。