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蛋白质是三大主要营养素之一,对动物的生长发育和新陈代谢起着至关重要的作用,小肽和游离氨基酸是蛋白质消化产物的主要形式,其中2-3个氨基酸组成的小肽的吸收是通过肠道上皮细胞上H+驱动小肽转运载体完成的,而游离氨基酸的吸收是通过肠上皮细胞上大量氨基酸转运载体实现的。本文意在探讨藏猪肠道小肽和氨基酸转运载体的组织分布以及发育性表达,为此,开展了①藏猪小肽转运载体PepT1 cDNA克隆,②藏猪哺乳阶段肠道小肽转运载体Pept1、酸性氨基酸转运载体EAAC1和碱性氨基酸转运载体CAT1 mRNA的组织特异性,③藏猪哺乳阶段肠道不同部位EAAC1、CAT1以及PepT1 mRNA表达的发育性变化研究。试验①:选取28日龄哺乳仔藏猪6头,以空肠中段为组织样本,运用RT-PCR技术对藏猪肠道小肽转运载体PepT1 cDNA进行了克隆。结果表明,首次成功克隆了藏猪小肽转运载体PepT1 cDNA的编码区,全长2127bp,Genbank基因序列号为:EU400159,预测该转运载体蛋白由708氨基酸组成。通过TMHMM软件对PepT1蛋白二级结构进行预测显示Pept1具有典型的膜蛋白结构,共有13个跨膜结构域,其中第10和11跨膜结构之间存在一个大的胞外环。试验②:选取体重接近并且健康的28日龄哺乳仔藏猪6头,屠宰后分离肠道(十二指肠、空肠前段、空肠后段和回肠),运用Real-Time PCR技术对藏猪不同肠段小肽转运载体PepT1,酸性氨基酸转运载体EAAC1和碱性氨基酸转运载体CAT1 mRNA的组织分布进行研究。结果发现,1)空肠后段PepT1 mRNA表达丰度最高,显著高于十二指肠、空肠前段和回肠(P<0.05);回肠PepT1 mRNA表达量最低,但与空肠前段以及十二指肠肠的差异不显著(P>0.05);2)从小肠近端到远端EAAC1 mRNA的表达丰度在小肠的表达呈升高趋势,即回肠表达最高,显著高于空肠前、后段和十二指肠(P<0.05);空肠后段次之,但与十二指肠、空肠前段差异不显著(P>0.05);3)不同肠段CAT1 mRNA表达格局与EAAC1相似,回肠中CAT1mRNA表达丰度最高,显著高于十二指肠(P<0.05);空肠前、后段差异不显著(P>0.05)。试验③:选取体重接近并且健康的哺乳仔藏猪30头,即1、7、14、21和28日龄各6头,运用实时定量PCR对PepT1、EAAC1、CAT1 mRNA表达的发育性变化进行了研究。结果表明,藏猪EAAC1、CAT1、PepT1 mRNA表达的发育性变化在十二指肠、空肠和回肠都有较大差异。其中十二指肠中CAT1、PepT1 mRNA表达的发育性变化相似,1-14日龄呈上升趋势并在14日龄达到最大值,21、28日龄均有所降低。1、7日龄EAAC1mRNA表达量显著大于14、21和28日龄;空肠中EAAC1、CAT1mRNA表达的发育性变化相似,1-14日龄呈上升趋势,21日龄显著下降,28日龄回升,1-21日龄PepT1 mRNA表达丰度呈递增趋势,28日龄略有下降。回肠中PepT1与EAAC1mRNA表达丰度具有相似的发育性变化,7日龄PepT1和EAAC1mRNA表达量均达到最大,14日龄显著降低,21日龄显著上升,28日龄略有下降。1-14日龄回肠CAT1 mRNA的表达丰度呈递增趋势,接着在21日龄显著下降,到28日龄反转显著增加并达到最高点。总体而言,哺乳仔藏猪不同肠道PepT1、EAAC1、CAT1mRNA的表达具有组织特异性,同一转运载体mRNA在不同肠段表达的发育性变化有所不同,同一肠段不同转运载体mRNA表达的发育性变化也有所不同。