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蛹虫草(Cordyceps militaris Fr Link),又名北冬虫夏草、北虫草。属子囊菌亚门(Ascomyxotina)、麦角菌科(Clavicipitaceae)、虫草属(Cordyceps),蛹虫草与天然冬虫夏草有相似的医疗和保健功效。据测定其主要成分虫草素的含量比天然冬虫夏草高10-20倍。在冬虫夏草野生资源短缺、产量日趋减少的今天,用蛹虫草替代冬虫夏草,正逐步得到科学证实。但是目前对于蛹虫草子实体抗氧化活性、抑菌效果、治疗败血症、抗疲劳方面的研究尚罕有报道,本文对蛹虫草的以上功能进行了研究。
本实验分为两大部分。前半部分是对蛹虫草主要有效成分的提取,通过比较索氏、超声、微波三种提取方法,通过正交试验探讨超声功率、微波强度、温度、作用时间和料液比等因素对虫草多糖和虫草素得率的影响,筛选最佳提取条件,并探讨了纯化过程中虫草多糖和虫草素的损失率。后半部分研究了蛹虫草提取物的抗氧化作用、体外抗真菌作用、治疗真菌引起的败血症作用和抗疲劳作用。
通过正交试验筛选出最佳提取法为微波提取,条件为:微波强度为P70,时间为3min,料液比为1:200,加液量为25 mL。以此方案进行实验,虫草多糖的得率为198.53 mg/g,虫草素的得率为28.47 mg/g。采用极差分析法对正交试验结果作直观分析,发现对虫草多糖得率影响大小的因素依次为:时间>加液量>料液比>微波强度。对虫草素得率影响大小的因素依次为:料液比>微波强度>时间>加液量。提纯过程中虫草素和虫草多糖都有较大的损失。虫草素在除杂质过程中损失近60%,过阳离子交换树脂柱后又损失将近70%;而虫草多糖在乙醇沉淀过程中损失较大,将近82%,但除蛋白后只损失20%左右。
对蛹虫草提取物体外抗氧化作用的研究发现,蛹虫草水提液和蛹虫草素有较强的清除羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH-自由基的能力;具有对FeSO4和H2O2诱导的鸡肝微粒体脂质过氧化物MDA生成抑制能力;具有对H2O2诱导小鼠红细胞溶血的抑制能力。而蛹虫草多糖没有明显的体外抗氧化能力。实验结果说明蛹虫草素是蛹虫草中主要的抗氧化物质。且虫草素的浓度在40 μg/mL以内时,抗氧化能力和浓度成正相关。
蛹虫草提取物体外抗白色念珠菌结果表明,蛹虫草水提液和蛹虫草素有较明显的抑菌作用,而蛹虫草多糖抑菌作用不明显,说明蛹虫草素是蛹虫草中主要抑制真菌的物质。
蛹虫草提取物体治疗败血症的结果表明,蛹虫草水提液对白色念珠菌引起的小鼠败血症有一定治疗作用,使患病小鼠20天内存活率从20%提高到80%,内脏的脓肿症状也得到缓解,但相对氟康唑(20天内存活率为100%)仍存在较大差距。但是,过高剂量的蛹虫草水提液对小鼠败血症的治疗效果反而下降,还会导致小鼠体重减轻。
蛹虫草提取物的抗疲劳实验结果表明,蛹虫草水提液会使小鼠体重略有上升,肝糖原和肌糖原增加,和对照组相比达到极显著水平,蛹虫草水提液还能抑制运动后血乳酸的增加。在竭力游实验中,蛹虫草水提液能延长小鼠的游泳时间,且抑制血尿素氮的增加,达到抗疲劳的目的。