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背景:胃癌是全球常见的恶性肿瘤之一,我国也是高发国家之一。胃癌的发生发展是基因遗传因素与环境因素共同作用的过程,其发病机制复杂交错,至今仍未完全阐明。溴结构域蛋白4(Bromodomain4,BRD4)是溴结构域和超末端结构(Bromodomain and Extra-Terminal domain,BET)家族成员之一,目前有研究发现BRD4在胃癌组织中表达增高,其在细胞的恶性转化和肿瘤的发生发展中扮演着重要的角色。而BRD4抑制剂能够抑制肿瘤细胞的恶性增殖,其中JQ1是最早报道的BRD4抑制剂,它对BRD4有着高度的亲和性和特异性,能嵌合在BRD4的乙酰化赖氨酸结合位点,抑制BRD4的表达。有研究表明在胃癌细胞中JQ1能下调原癌基因c-Myc表达,从而抑制细胞增殖和迁移能力,但具体作用机制目前仍不清楚。远端上游元件结合蛋白1(Far Upstream Element Binding Protein 1,FUBP1)作为原癌基因c-Myc的转录调控因子首次被发现。其在胃癌中表达增高,且能够影响肿瘤细胞的恶性增殖和迁移能力。因此FUBP1是否参与了 JQ1对胃癌细胞增殖和迁移的抑制途径有待进一步研究。目的:本研究旨在探讨BRD4抑制剂JQ1通过下调转录因子FUBP1表达,进一步抑制原癌基因c-Myc表达,发挥它对胃癌细胞增殖和迁移的抑制作用。为BRD4抑制剂JQ1治疗胃癌的机制提供新的科学依据,也为临床转化研究中将BRD4、FUBP1作为潜在的干预靶点提供理论基础。方法:1.提取66对胃癌和癌旁组织mRNA和蛋白,通过RT-qPCR、Western blot和免疫组织化学法检测胃癌组织中BRD4和FUBP1的表达水平,并与临床病理特征进行相关性分析;2.JQ1处理胃癌细胞后,通过Western blot方法检测BRD4、FUBP1、c-Myc蛋白表达水平,通过CCK-8实验和细胞克隆形成实验检测细胞增殖能力,通过细胞划痕实验和Transwell细胞迁移实验检测细胞迁移水平;3.在胃癌细胞中转染FUBP1 siRNA后,通过RT-qPCR和Western blot检测FUBP1、c-Myc mRNA和蛋白表达水平,并进行细胞功能实验检测细胞增殖和迁移能力;4.在胃癌细胞中转染BRD4 siRNA后,通过RT-qPCR和Western blot检测BRD4、FUBP1、c-Myc mRNA和蛋白表达水平,并构建FUBP1启动子区质粒,与BRD4 siRNA共转染胃癌细胞,用荧光素酶报告基因检测方法检测荧光素酶活性。结果:1.胃癌组织BRD4表达高于癌旁组织(RT-qPCR结果为2.85±1.96和1.31±1.42,P=0.001)。胃癌组织FUBP1表达高于癌旁组织(RT-qPCR结果为13.57±18.40和7.71±7.47,P=0.03),且与肿瘤大小、TNM分期具有相关性(P=0.02,P=0.009)。GEO数据库结果分析显示FUBP1表达增高的患者生存率低于FUBP1表达低的患者;2.JQ1处理胃癌细胞后,BRD4、FUBP1和c-Myc的蛋白表达水平降低,细胞增殖数量减少,迁移能力降低;3.干扰FUBP1后,c-Myc的mRNA和蛋白表达水平降低,胃癌细胞增殖和迁移能力降低;4.干扰BRD4后,FUBP1和c-MycmRNA和蛋白表达水平降低,且相对于阴性对照组,干扰BRD4后FUBP1启动子区荧光素酶活性降低。结论:BRD4和FUBP1在胃癌组织中表达增高,FUBP1高表达提示预后不佳,且与肿瘤大小、TNM分期具有相关性。BRD4抑制剂JQ1可通过FUBP1抑制原癌基因c-Myc表达,进而抑制胃癌细胞增殖和迁移能力。