目的：　　肥胖的发生被认为是一种慢性炎症状态，体内脂肪细胞增生和肥大造成脂肪组织局部缺氧，而缺氧又与慢性炎症有关。本实验拟通过对培养3T3-L1前脂肪细胞并将其诱导分化为成熟脂肪细胞后，进行缺氧处理（1％O2,5%CO2,94N2），检测缺氧对脂肪细胞脂质代谢及内分泌功能的影响，初步探讨缺氧对脂肪细胞脂质代谢和内分泌功能的调节机制，为肥胖发病机制的研究提供了新的方向和思路。　　方法：　　1．将3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞(油红O染色鉴定)。除对照组外，其余进行缺氧处理（1%O2,5%CO2,94N2）,Real-TimePCR检测缺氧处理后不同时间点激素敏感型脂肪酶（HSL）、脂肪酸合成酶（FASN）mRNA，WesternBlot检测不同时间点磷酸化AMPK(pThr172-AMPK)、激素敏感型脂肪酶（HSL）、脂肪酸合成酶(FASN)、磷酸化Ser565激素敏感型脂肪酶(pSer565-HSL)蛋白表达水平。　　2．将3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞(油红O染色鉴定)。分别收集正常组、缺氧组（缺氧处理24小时）培养液上清和细胞。分光光度法测定缺氧前后培养液上清中甘油、游离脂肪酸含量；裂解细胞，测定细胞内ATP的含量。　　3．将3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞(油红O染色鉴定)。ELISA法检测缺氧前后不同时间点IL-6、TNF-α和脂联素的含量；分光光度法测定葡萄糖消耗量。　　结果：　　1、本研究通过将3T3-L1前脂肪细胞诱导为脂肪细胞用于实验，油红O染色鉴定。3T3-L1是国际上公认的研究脂肪细胞分化的细胞模型，实验人员熟练掌握了诱导方法，可保证稳定的细胞诱导成熟率。　　2、缺氧处理脂肪细胞后，通过荧光实时定量PCR方法从mRNA水平检测不同时间点HSL、FASN的表达情况，结果为:HSLmRNA相对量随缺氧时间的延长无明显变化；FASNmRNA相对量（除2h、4h外）随缺氧时间的延长显著降低。　　3、与对照（0h）相比，pThr172-AMPK在缺氧处理后，蛋白表达增加；HSL在缺氧前后无明显变化,但磷酸化Ser565HSL、FASN蛋白随缺氧时间的延长减弱(P<0.05)。　　4、与正常相比，缺氧24h后，甘油(正常73.03±10.42μmol/L，缺氧204.47±38.93μmol/L)、游离脂肪酸（正常188.92±19.71μmol/L,缺氧530.43±87.42μmol/L）含量明显升高，而细胞内ATP含量明显降低(正常168.32±1.98μmol/gprot，缺氧50.11±9.40μmol/gprot)。　　5、缺氧处理后（除4h外），葡萄糖消耗明显增加。(P<0.05)　　6、与正常相比，缺氧处理4h、8h、16h、24h后，培养液中IL-6含量明显增加（P<0.05）,、TNF-α含量总体无明显变化（P>0.05），而脂联素水平则明显被降低（P<0.05）。　　结论：　　1、缺氧使脂肪细胞脂解增加，FFA水平升高。　　2、缺氧使脂肪细胞内炎症因子水平升高，抗炎症因子水平下降，提示缺氧可能在炎症发生过程中起着重要作用。　　3、缺氧使脂肪细胞内葡萄糖消耗增加，但细胞内ATP含量减少。