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大肠癌是最常见的恶性肿瘤之一，随着我国人口老龄化、生活习惯、饮食结构以及环境的改变，大肠癌的发病率呈上升趋势。目前大肠癌病因却尚未完全清楚，疗效也不理想。如何更好地干预、阻断大肠癌的发生发展是当前应迫切解决的问题。诸多因素影响大肠癌的生长分化和侵袭转移，其中包括多种(抑)癌基因。
窖蛋白-1(Caveolin-1)基因定位于7q31.1，该区域被认为含有肿瘤抑制基因。目前，对Caveolin-1在肿瘤中作用的研究结果并不一致：在多数体外研究中，Caveolin-1起到肿瘤抑制因子的作用；然而，在很多回顾性临床研究中Caveolin-1高表达与多种肿瘤的转移及不良预后密切相关。
增殖细胞核抗原(Proliferating-cell nuclear antigen，PCNA)是真核细胞DNA聚合酶δ的推动因子，协调DNA复制过程。检测PCNA在临床上可作为反映细胞增殖的一项良好指标。
血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor，VEGF)是促进血管生成的重要因子，在肿瘤的生长过程中，肿瘤细胞分泌VEGF急剧增加，能够显著增加肿瘤血管形成，加速肿瘤演进过程，表现出转移特征。应用CD34对肿瘤组织切片进行免疫组化染色并测量肿瘤微血管密度(microvessel density,MVD)，是目前常用的评价肿瘤血管生成情况的方法。
本研究旨在运用免疫组织化学染色技术，检测人大肠癌和正常大肠黏膜Caveolin-1蛋白、PCNA、VEGF、CD34的表达，探讨它们的表达特点和相互关系，及其与大肠癌临床、病理等生物学行为之间的关系。初步探讨Caveolin-1蛋白在大肠癌发生和发展中的作用。
材料和方法:
1、大肠癌石蜡组织标本收集
1999年1月至2000年12月我院外科手术切除的原发性大肠癌标本76例。年龄59.1±12.6(岁)，男47例，女29例。其中随诊资料比较完整者有62例。取内镜和病理检查未发现明显异常的正常人大肠黏膜活检组织24例作为对照组。
2、主要试剂：
兔抗人Caveolin-1蛋白多克隆抗体(Santa Cruz公司)、鼠抗人VEGF单克隆抗体(Santa Cruz公司)、鼠抗人PCNA单克隆抗体(Dako公司)、鼠抗人CD 34单克隆抗体(Dako公司)。
3、实验方法
用链霉素抗生物素蛋白-生物素-过氧化物酶免疫组织化学染色方法检测大肠癌组织和正常大肠黏膜组织Caveolin-1蛋白表达、PCNA标记指数(PCNA Label Index，PCNA-LI)、VEGF蛋白表达及CD34标记的MVD。
4、统计学处理
计量资料的数据表示为均数±标准差。计量资料检验采用独立样本t检验、单向方差分析或秩和检验。计数资料比较采用四格表资料的Fishers精确概率法检验或R×C表资料的x<2>检验。相关分析采用Spearman rank test。生命曲线用Log-Rank检验，应用COX模型进行单因素和多因素分析。
结果:
1、大肠癌细胞Caveolin-1表达及其与患者临床、病理特征的关系
大肠癌细胞Caveolin-1表达率(60.5﹪)高于正常大肠黏膜腺上皮细胞(33.3﹪)，差异有显著性(P<0.05)。大肠癌细胞Caveolin-1表达与大肠癌患者年龄、性别、癌瘤生长部位、组织学分级及术后生存时间无明显关系(P>0.05)。大肠癌细胞Caveolin-1表达率与Dukes分期有关，Dukes C期和D期高于Dukes A期和B期(P<0.05)。 76例大肠癌患者中，随诊资料比较完整者有62例，术后5年生存率为52.3±6.6(﹪)。其中Caveolin-1表达阳性组术后5年生存率为41.7±8.5(﹪)，阴性组为67.4±9.6(﹪)，Log-Rank检验显示差异有显著性(x<2>=6.35，P=0.0118)。
2、大肠癌细胞Caveolin-1表达与PCNA表达、VEGF表达及MVD的关系
2.1、大肠癌细胞Caveolin-1表达与PCNA表达的关系
PCNA-LI大肠癌为53.9±25.0(﹪)，正常大肠黏膜为18.9±9.7(﹪)，大肠癌PCNA-LI明显增加(P<0.01)。Caveolin-1蛋白阳性者PCNA-LI为58.9±25.1(﹪)，显著高于阴性者46.2±23.2(﹪)(P<0.05)；大肠癌细胞Caveolin-1表达和PCNA-LI有显著的正相关(r=0.264，P=0.021)。
2.2、大肠癌细胞Caveolin-1表达与VEGF表达的关系
24例正常大肠黏膜未见VEGF阳性表达。76例大肠癌中有60例VEGF阳性表达，占78.9﹪。Caveolin-1蛋白阳性者VEGF阳性率89.1﹪，显著高于阴性者的633﹪(P<0.05)；大肠癌细胞Caveolin-1表达和VEGF表达率有非常显著的正相关(r=0.309，P=0.007)。
2.3、大肠癌细胞Caveolin-1表达与MVD的关系
MVD大肠癌为(36.3±10.7)，正常大肠黏膜为(18.7±6.4)，大肠癌MVD明显高于正常大肠黏膜(P<0.01)。大肠癌细胞Caveolin-1蛋白阳性者的MVD(38.8±10.2)，显著高于阴性者(32.5±10.4)(P<0.05)；大肠癌细胞Caveolin-1表达和MVD有显著的正相关(r=0.274，P=0.016)。大肠癌VEGF表达阳性者MVD(38.2±10.6)，显著高于阴性者(29.1±7.6)(P<0.01)；大肠癌VEGF阳性表达和MVD有非常显著的正相关(r=0.375，P=0.001)。在肿瘤浸润边缘，微血管较密集，此时VEGF表达也明显，显示了VEGF表达与新生血管化部位的一致性。
3、大肠癌患者预后影响因素的分析
COX风险比例函数模型分析显示只有Dukes分期和Caveolin-1蛋白表达两项变量进入最后分期。在控制Dukes分期因素在平均水平后得出的Caveolin-1蛋白表达在回归方程中的死亡风险比为2.305，表明Caveolin-1蛋白表达者，其死亡的相对风险增加2.305倍。
结论:
1．大肠癌细胞Caveolin-1蛋白表达率明显增高；Caveolin-1表达与大肠癌Dukes分期相关，Caveolin-1蛋白阳性者临床分期较晚；大肠癌细胞Caveolin-1蛋白阳性者术后5年生存率明显低于Caveolin-1阴性者。
2．大肠癌细胞Caveolin-1蛋白表达可显著上调PCNA-LI、VEGF蛋白表达及MVD，并有显著的正相关，提示Caveolin-1表达对大肠癌预后的影响可能是通过促进大肠癌组织新生血管生成和细胞增殖的作用。
3．大肠癌细胞Caveolin-1蛋白表达可能是影响大肠癌患者术后预后的独立危险因素。