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本研究以北京油鸡种公鸡为试验材料,以热休克蛋白70-2基因(HSP70-2)为候选基因,分析该基因5’侧翼区和编码区的遗传多态性与北京油鸡公鸡精液品质的相关性,并研究热应激对不同基因型公鸡繁殖性状及HSP70-2基因mRNA表达量的影响。旨在为北京油鸡繁殖力标记辅助育种研究奠定基础。试验一:选用220只北京油鸡成年公鸡为研究对象,检测HSP70-2的多态性,并分析其多态性及基因型(组合)对精液品质性状的影响。试验二:在试验一基础上,按基因型组合选用84只30周龄北京油鸡公鸡,分成热应激组(37℃,10h;30℃,14h)和对照组(23℃;24h),应激10天,测定精液品质、受精率、入孵蛋孵化率、受精蛋孵化率、健雏率及HSP70-2基因mRNA表达量。研究不同基因型及其组合公鸡抗热应激能力的差异。主要研究结果如下:1.采用PCR-SSCP、PCR-RFLP及测序技术对HSP70-2基因进行多态性筛查,结果发现A-68G(P5)、G286C(P7)和A1054G(P8)三个突变。用TFSEARCH软件预测发现,P5位点的突变产生了一个MZF-1调控元件的结合位点,可能对HSP70-2基因的转录产生影响;编码区P7和P8位点发生的突变为沉默突变,未引起氨基酸序列的改变。多态位点基因型与精液品质关联分析表明,5’侧翼区P5位点AG基因型为精子活力、精子活率、精子畸形率的不利基因型,编码区P7位点GG基因型为精子活力和精子畸形率的优势基因型,P8位点AG基因型为精液pH和精子畸形率的不利基因型。2.P5、P7和P8三位点两两组合基因型与精液品质性状关联分析的结果表明,P5P7位点AGCC基因型组合和P5P8位点AGAG基因型组合为精子活力及畸形率的不利基因型。3.选择P5、P8两个位点共五种组合基因型个体进行热应激试验,结果表明,应激后五种基因型组合个体精子活力均出现不同程度下降,畸形率较对照组显著升高(P<0.05)。AGAG型的精液品质受热应激影响下降最严重。五种基因型组合HSP70-2基因mRNA表达检测结果表明,不同处理组相同基因型间表达差异显著(p<0.05),热应激后AAAA型最高,AGGG型最低。不同基因型相同处理组间表达差异显著(p<0.05),AAAA型在应激组中最高,AGAG基因型表达量受热应激影响最大。4.孵化试验结果表明,P5P8热应激期间,P5、P8两个位点组合中突变纯合基因型GGGG型受精率、孵化率和健雏率高于杂合基因型AGAG型。两种基因型热应激期的受精率、孵化率和健雏率显著低于恢复期,应激结束一至两周后恢复正常。AGAG基因型受精率、孵化率和健雏率受温度影响较大。综上所述,HSP70-2基因的突变可能是影响北京油鸡精液品质的重要因素之一,剔除P5P8组合中AGAG不利基因型个体,可能提高北京油鸡的繁殖性能。同时,本试验首次从鸡繁殖性能角度验证了HSP70-2基因抗热应激功能的存在。