人参皂苷Rg1、胰岛素样生长因子-1及二者合用抗帕金森作用的机制研究

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人参皂苷Rg1(ginsenoside Rg1)是人参主要的活性成分,具有神经营养和神经保护作用。胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor1,IGF-1)是脑内非常重要的生长因子,可以促进神经元的分化和存活。机制研究显示Rg1与IGF-Ⅰ的神经保护作用均与IGF-Ⅰ受体(IGF-R)信号途径有关,但二者合用是否具有协同作用,尚不清楚。本实验应用6-羟基多巴(6-hydroxydopamine,6-OHDA)损伤多巴胺能神经元细胞系SK-N-SH细胞,建立帕金森病(Parkinsons disease,PD)细胞模型,神经毒素1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)制备的PD小鼠模型,应用MTT法、免疫组织化学染色法、高效液相色谱法及免疫印迹法等多种评价方法,探讨人参皂苷Rg1、IGF-1及二者合用对多巴胺能神经元的保护作用及其可能机制。实验结果如下:  1.IGF-1可剂量依赖式对抗6-OHDA对SK-N-SH细胞的损伤(P<0.05)。Rg1与IGF-1合用具有协同作用(P<0.05)。  2.6-OHDA能够明显降低Bcl-2蛋白表达(P<0.05)。Rg1、IGF-1及二者合用均可逆转上述变化,且Rg1与IGF-1合用组作用最明显(P<0.05)。  3.6-OHDA可明显升高Bax蛋白表达(P<0.05)。Rg1、IGF-1及二者合用均可逆转上述变化(P<0.01)。Rg1与IGF-1合用组与单用组相比,无统计学意义(P>0.05)。  4.MPTP可明显降低小鼠纹状体DA及其代谢产物DOPAC,HVA的含量,IGF-1(0.4μg/μl,0.5μg/μl,1μg/μl)能够对抗MPTP的毒性作用,其中0.5μg/μl IGF-1神经保护作用最为明显(P<0.05)。  5.Rg1、IGF-1及二者合用均可以明显增加DA及其代谢产物DOPAC,HVA含量,与MPTP组相比,差异显著。且Rg1与IGF-1二者合用的效果最为明显(P<0.05)。  6.MPTP可明显减少小鼠黑质酪氨酸羟化酶免疫阳性(TH-IR)神经元数目。Rg1、IGF-1及二者合用均可明显增加TH-IR神经元的数目,且以二者合用组的作用最为显著(P<0.05)。  7.MPTP可明显减少小鼠黑质抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,增加促凋亡蛋白Bax的表达。Rg1、IGF-1及二者合用均可明显逆转上述变化,且以二者合用的效果最为明显(P<0.05)。  上述结果表明Rg1、IGF-1及二者合用均能够对抗神经毒素对DA神经元的毒性作用,且Rg1与IGF-1合用具有协同作用。本研究为PD的预防与治疗开辟了新的途径,提供了新的实验依据。  
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