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牛酪蛋白由牛的乳腺上皮细胞合成并分泌，主要由α、β、及κ酪蛋白组成，它们不仅承担着牛乳蛋白重要的营养作用，同时也发挥着乳腺防御及免疫调控的功能。乳腺上皮细胞分泌酪蛋白的水平高低，既反应了牛乳腺的生理功能状态，也是我们评估乳品品质的关键指标。此外，国内外乳品市场中山羊乳产品价格远高于牛乳产品价格，这种价格悬殊导致一些商家人为地向山羊乳原料或乳制品中掺入牛乳成分。基于此，本论文利用牛α酪蛋白材料，以BABL/c小鼠为试验动物，制备抗牛乳α酪蛋白免疫血清，建立并优化牛α酪蛋白抗体的ELISA检测方法，采用常规的单克隆抗体制备技术，制备抗牛α酪蛋白的杂交瘤细胞株及相应的单克隆抗体，初步探讨了抗牛α酪蛋白单克隆抗体在一些检测技术中应用的可行性。研究取得如下结果： 1.获得了牛α酪蛋白的免疫血清，抗体效价为1：106。 2.建立并优化了牛α酪蛋白抗体的ELISA检测方法。优化结果为：牛α酪蛋白包被浓度为10μg/mL，4℃包被孵育12h；一抗孵育时间为60min。 3.获得一株杂交瘤细胞株，能够稳定分泌特异性识别牛α酪蛋白的单克隆抗体，命名为1-C3。 4.制备的抗牛α酪蛋白的单克隆抗体属于IgG1类，轻链为κ亚型。腹水的抗体效价为1：2×105。 5.间接免疫荧光试验显示，制备的单克隆抗体能够识别牛乳腺上皮细胞中的α酪蛋白，进一步的试验结果表明，LPS刺激牛乳腺上皮细胞后，乳腺上皮细胞表达α酪蛋白的量略有升高；建立了羊乳中牛α酪蛋白含量的间接ELISA和阻断ELISA检测方法。 结论：本研究成功地制备出了1株杂交瘤细胞株，它能够特异性识别牛α酪蛋白。制备的抗牛α酪蛋白单克隆抗体能够用于牛乳腺上皮细胞中α酪蛋白的免疫荧光测定和羊乳中牛α酪蛋白的ELISA测定。