丙酸盐、丙酮酸盐、β-羟丁酸对牛肝细胞PCmRNA和PEPCKmRNA丰度的影响

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本研究通过体外新生牛肝细胞单层培养,采用竞争PCR 方法检测不同浓度的不同底物对肝糖异生关键酶丙酮酸羧化酶(pyruvate carboxylase,PC)mRNA 丰度和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(Phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK)mRNA 丰度的影响。结果显示:随着丙酸盐浓度的升高,肝细胞PCmRNA 丰度呈上升趋势,PEPCKmRNA 丰度呈先升高后降低趋势,各浓度组之间差异显著(P<0.01),丙酸盐浓度与肝细胞PCmRNA 丰度呈明显的正相关(r=0.94,p<0.01=,丙酸盐在一定浓度范围内对PEPCKmRNA 丰度具有上调作用;随着丙酮酸盐浓度的升高,肝细胞PCmRNA丰度和PEPCKmRNA丰度均呈先上升后下降趋势,不同浓度处理组间差异显著(P<0.01),丙酮酸盐浓度为4.0mmol/L 时PCmRNA 丰度最高,丙酮酸盐浓度>4.0mmol/L 时PCmRNA 丰度呈下降趋势,但仍高于对照组,丙酮酸盐在8mmo/L 时,PEPCKmRNA 丰度最高,指示在一定浓度内丙酮酸盐对肝细胞PCmRNA 和PEPCKmRNA 丰度有上调作用;添加β-羟丁酸的浓度不超过生理浓度范围(<1.0mM)时,PCmRNA 丰度有所增加(P<0.05),但当β-羟丁酸浓度>1.0mM时,PCmRNA 丰度则急剧降低,显著低于未添加组,β-羟丁酸作为代谢产物对PCmRNA 表达可能主要起抑制作用。上述结果表明,适量的丙酸盐、丙酮酸盐可通过上调PCmRNA 和PEPCKmRNA 表达水平,提高肝糖异生能力;而β-羟丁酸浓度超过生理范围则可抑制PCmRNA 表达,降低糖异生能力,加剧能量负平衡。
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