【摘 要】
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该文的研究工作分为两个部分：1.二氢叶酸还原酶激活机制的进一步研究 为进一步了解二氢叶酸还原酶巯基修饰过程中激活机制,首先研究了p-HMB等几种巯基修饰剂对中华仓鼠二氢叶
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该文的研究工作分为两个部分：1.二氢叶酸还原酶激活机制的进一步研究 为进一步了解二氢叶酸还原酶巯基修饰过程中激活机制,首先研究了p-HMB等几种巯基修饰剂对中华仓鼠二氢叶酸还原酶的修饰与激活作用,而后用动力学的方法分析了激活过程中的构象变化.2.Trigger factor的性质及其分子伴侣作用 对Trigger factor被盐酸胍变性和复性的稳态和动力学研究显示,用不同方法监测到的变性过程是不同步,这可能是由于各结构域的折叠是相对独立的,使得在TF变性过程中,存在不止一个折叠中间态.其稳定中间态与已报道的融球态中间体的结构特征不同,它与ANS的结合很弱,只含有30﹪的二级结构,Tyr残基明显暴露.此中间态可能与trigger factor的分子伴侣功能有关.为了进一步研究Trigger factor的分子伴侣功能,构建了trigger factor与包涵体蛋白（AK）共表达的体系,获得了缺失PPIase活性的trigger factor突变体,发现在这个共表达体系中Trigger factor能帮助AK正确折叠成为可溶性的蛋白,缺失PPIase活性的trigger factor突变体也有同样的功能,表明Trigger factor的分子伴侣功能是独立于其催化活性的.
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