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药物成瘾表现为对药物的强烈渴求和强迫性的用药行为以及撤药后产生的戒断症状。负性情绪记忆是药物戒断的结果，是导致复吸的关键因素。负性情绪记忆的形成伴随着相关脑区突触结构的重塑和大脑神经环路的改变。 我们实验室运用条件位置厌恶模型(Conditioned Place Aversion，CPA)来研究吗啡戒断负性情绪记忆形成中突触结构重塑的分子机制。条件位置厌恶模型是经典的巴普洛夫条件反射模型，利用药物引起的负性情绪与特定的环境线索联系起来，当戒断后的动物再次暴露于该环境中，能够产生强烈的厌恶动机，驱使动物逃离该环境。在动物厌恶情绪记忆形成过程中，伴随着突触结构的重塑。我们前期的研究结果发现背侧海马突触骨架actin的重排参与了吗啡戒断负性记忆的形成。然而我们对调控背侧海马突触骨架actin重排的机制，以及背侧海马突触骨架重排在吗啡戒断负性记忆形成中的作用了解并不清楚。 组蛋白去乙酰化酶Sirt2是组蛋白去乙酰化酶家族成员，在细胞核内能够修饰组蛋白，在细胞质中能够调节细胞骨架微管蛋白的乙酰化。近年来对微管蛋白翻译后修饰的研究发现这些蛋白修饰能够影响微管的功能，调节突触骨架的变化。因此，本文利用条件位置厌恶模型进一步研究背侧海马actin骨架重排是如何受到调控的。通过蛋白免疫印迹技术、免疫共沉淀技术、脑立体核团定点注射技术及腺相关病毒干扰技术等手段，探讨组蛋白去乙酰化酶Sirt2如何通过影响突触骨架微管蛋白tubulin的乙酰化水平，进而调控磷酸酶calcineurin对微管末端结合蛋白EB3的磷酸化进行调节，引起EB3在突触表达的增加，从而介导突触骨架重塑的过程，导致吗啡戒断负性记忆的形成。具体的研究结果如下: 1.Sirt2调控微管蛋白的乙酰化水平影响了微管的功能，参与到吗啡戒断负性记忆的形成过程。Sirt2在吗啡戒断后背侧海马组织中蛋白水平表达升高，伴随着微管蛋白乙酰化水平显著降低。给予Sirt2抑制剂AGK2能够抑制CPA的形成，蛋白免疫印迹检测发现给予AGK2能抑制CPA训练引起的微管蛋白乙酰化水平的降低。 2.微管蛋白乙酰化水平的下降，增强了磷酸酶calcineurin与微管结合的能力，促进calcineurin对EB3脱磷酸化的调控，增加EB3在突触的表达，进而影响EB3下游的信号。 3.EB3蛋白在突触组分中表达增加，通过腺相关病毒干扰EB3蛋白表达，能够抑制CPA的形成。同时Sirt2抑制剂AGK2能够抑制EB3在突触的表达。 4.微管末端结合蛋白EB3与p140Cap形成EB3-p140Cap蛋白复合体作用增强，使得p140Cap蛋白在突触表达增加，抑制了下游Src酪氨酸激酶活性，通过Src-cortactin-co filin信号通路抑制剪切因子cofilin剪切F-actin的能力，促进actin的重排，导致吗啡戒断负性记忆的形成。