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目的:本课题拟通过动态观察“益肾调督”针法对脑缺血再灌注大鼠脑组织的TNF-αmRNA和蛋白表达的影响,旨在从分子角度进一步探讨“益肾调督”针法对缺血性脑损伤的保护机制,以便深入揭示针刺治疗脑缺血的机理。 方法:根据随机对照的原则,按随机数字表将Wistar大鼠分为正常组、假手术组、模型组、益肾调督针刺组和普通针刺组。采用线拴法闭塞大鼠左侧大脑中动脉制成MCAO模型。对各组实验动物进行相应的干预,分别在12、24、48小时处死实验动物,然后进行标本制备,分别采用免疫组化、原位杂交技术,检测大鼠脑组织TNF-αmRNA和蛋白的表达。 结果:实验结果表明,局灶性脑缺血1h,再灌注12h脑组织TNF-αmRNA及蛋白的表达即明显升高。TNF-α蛋白表达24h达高峰,然后逐渐降低,至48h仍明显高于正常组;TNF-α mRNA的表达12h相对较高随后逐渐呈递减趋势。各时段缺血组脑组织TNF-α mRNA和蛋白的表达与同时段假手术组及正常组比较均有显著性差异(P<0.01),针刺后各组大鼠脑组织中TNF-α mRNA及蛋白的表达较同时段缺血组比较明显降低(P<0.05,P<0.01),表明益肾调督针法可降低脑组织中TNF-α mRNA及蛋白的表达。脑组织形态学显示模型组符合脑梗塞形态学改变,益肾调督针法组与普通针刺组镜下示神经元及间质结构己基本恢复正常,细胞轮廓及核仁较清晰。 结论:益肾调督针法通过抑制TNF-α mRNA的表达减少TNF-α蛋白的合成,以对抗缺血再灌注脑组织神经损伤,发挥脑保护作用。