拟南芥ROBRI1和ROBRI2蛋白参与BR信号通路以及植物生长发育的研究

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油菜素甾醇(Brassinosteroids,BRs)是一类重要的甾醇类植物激素,它们在植物生长发育的各个时期都起到至关重要的作用。近20年以来随着技术的不断发展进步,人们对BR的了解越来越深入。运用正向遗传学与反向遗传学结合的手段,许多与BR相关的组分被发现并且整合到了BR合成途径或者BR信号通路中。然而由于细胞调控的复杂性以及技术的局限性,BR信号通路的传递以及调节机制还没有被完全阐明。为了寻找新的参与BR信号通路的组分和调节机制,我们对BR受体缺陷型突变体bri1-301进行了EMS诱变筛选。bri1-301是bri1的弱等位突变体,呈现微弱的BR缺陷表型。在遗传筛选过程中发现了一系列抑制子,这些引起抑制子表型的基因被命名为ROBRI。其中ROBRI1基因突变部分恢复bri1-301的生长表型以及对BR的敏感性。基因克隆发现ROBRI1基因编码拟南芥寡糖基转移酶复合体的催化亚基STT3A,STT3A复合体可以将脂质寡糖链上的寡糖链催化转移到内质网中新合成蛋白的NXT/S位点上从而完成N-糖基化修饰。通过遗传与生化的手段发现,STT3A基因突变会影响BRI1(N653)位点的N-糖基化修饰从而提高BRI1的生物学功能。此外还发现,ROBRI2基因突变使bri1-301突变体的叶柄长度以及开花时间等生长表型得到很好的恢复。基因克隆发现ROBRI2编码一个未知功能蛋白,结构预测显示ROBRI2包含2个酪氨酸蛋白磷酸酶(PTP)类型的植酸酶结构域(PTPLP),研究表明第一个PTP基序对于ROBRI2蛋白的功能至关重要,通过遗传及表型分析发现ROBRI2在高温下对植物生长发育的影响可能需要PIF4的介导。本论文从正向遗传学角度切入进而对ROBRI1与ROBRI2进行了系统的研究,进一步阐明了二者在油菜素甾醇信号通路以及植物生长发育进程中的作用,为后续的科学研究提供了可靠的参考依据。
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