背景肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是临床上最常见的恶性肿瘤之一,以其高发病率和高度恶性行为著称,占我国癌症死亡率的第二位。随着肝脏影像学技术的进步,肝切除技术的发展及围手术期管理知识和经验的不断积累,肝细胞癌患者的治疗效果较前有了显著提高,但是患者的总体预后仍不令人满意,肝癌术后5年累计复发率可高达35%-75%。究其原因,与肝癌恶性程度高,一般情况下癌灶周围血供丰富,肿瘤进展快,早期易发生肿瘤细胞的肝内和／或肝外微转移,或者出现肝脏门脉的癌栓,加之手术有时不能彻底切净癌灶,手术过程中还有可能造成医源性的肝癌细胞转移,术后对化疗药物不甚敏感有关。因此,要想更好更彻底的治疗肝细胞癌,必须全方面多时段的了解掌握肝细胞癌进程,寻找突破口。肿瘤分子细胞生物学是近年来新兴的一门学科,它通过各种现代分子生物学技术,在基因和分子的水平上研究肿瘤的发生机理,揭示肿瘤细胞在基因组DNA的突变、表观遗传学方面变化引起的基因转录表达异常、以及细胞信号转导方面发生的紊乱,发现肿瘤细胞在以上方面和正常细胞的区别,并最终将这些知识用于肿瘤的诊断、治疗和新型抗肿瘤药物的设计和研发,达到最大程度地早期诊断肿瘤和最终治愈肿瘤的目的。近年来,肿瘤分子生物学推断水通道蛋白(aquaporin,AQP)将可能是针对肿瘤细胞生存、侵袭和转移的一种新的作用靶点。目前研究发现水通道蛋白(aquaporin,AQP)是一种广泛存在于细胞膜上的水通透性蛋白,在哺乳动物各种组织细胞中有着广泛的分布,已知的在哺乳类共发现有13个成员(命名为AQP0-12),其中AQP9具有独特的转运活性,除了对水有转运活性外,还对其他多种非带电的中性物质,如脲、多羟基化合物、嘌呤、嘧啶、尿素等具有通透性,包括对常用的抗肿瘤药物5-氟尿嘧啶具有转运活性。因此本实验研究以肝细胞癌为研究对象,应用免疫组织化学和蛋白免疫印迹方法研究水通道蛋白9(AQP9)在人肝细胞癌组织和正常肝组织中的表达差异,旨在初步探讨表达差异的意义。方法1.应用免疫组织化学(IHC)技术检测AQP9在肝细胞癌组织和非肝细胞癌组织中的分布及表达情况实验分为肝细胞癌组织组(n=42)和非肝细胞癌组织组(n=42),分别切取石蜡切片,应用免疫组织化学技术检测两组组织中AQP9的表达与分布；2.应用蛋白免疫印迹(Western Blot, WB)试验方法半定量的检测AQP9在肝细胞癌组织和正常肝组织中的表达情况；3.统计所有42例肝细胞癌患者临床资料,追踪患者术后病检结果；4.用统计学方法进行分析,以确定AQP9在两组之间表达是否具有差异,是否与患者临床病理参数有关联。结果1.应用免疫组织化学方法可以检测出AQP9在两组组织中的表达；2.应用蛋白免疫印迹法可以半定量的检测AQP9在两组组织中的表达;3.AQP9在非癌组织中的高表达率为73.81%(31／42),在癌组织中高表达率为40.48%(17／42),AQP9在非肝癌组织和肝癌组织中表达情况存在显著性差异(P<0.01)；4.统计学分析表明,Ⅰ—Ⅱ级分化肝癌组织和Ⅲ-Ⅳ分化肝癌组织之间AQP9表达水平之间有统计学差异。结论1.在肝细胞癌组织和非肝细胞癌组织中均能检测到AQP9的表达；2.AQP9在非肝癌组织的表达要高于其在肝癌组织中表达；3.AQP9在Ⅰ—Ⅱ级分化肝癌组织的表达水平亦高于Ⅲ-Ⅳ分化肝癌组织AQP9表达水平；