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目的:细胞程序性凋亡是一个由多种凋亡促进因子和凋亡抑制因子共同参与的精细调控的复杂过程,促凋亡因子的失活和/或凋亡抑制因子的激活,都可能导致细胞失去凋亡能力而诱使肿瘤发生与发展。凋亡抑制因子(inhibitor of apoptosis proteins, IAPs)家族中的Survivin通过直接或间接作用于caspase而达到抑制细胞凋亡的目的。有研究表明天花粉蛋白可诱导子宫颈癌 HeLa细胞发生凋亡,而细胞凋亡通路中caspase-3的激活是介导 TCS诱导 HeLa细胞发生凋亡的机制之一。本课题的主要目标是研究天花粉蛋白对子宫颈癌 Hela细胞凋亡通路中的Survivin基因表达的影响,并探讨天花粉蛋白诱导子宫颈癌 Hela细胞凋亡的机制,为其抗子宫颈癌的临床应用提供理论基础。 方法:(1)MTT法观察天花粉蛋白对子宫颈癌 Hela细胞增殖的抑制作用。(2)RT-PCR和Western blotting分别用于检测天花粉蛋白对子宫颈癌 Hela细胞中Survivin基因的mRNA和蛋白表达水平的影响。(3)流式细胞术检测天花粉蛋白对子宫颈癌Hela细胞细胞周期的影响。 结果:1.MTT结果表明,TCS显著性抑制Hela细胞的生长,在0-80μg/mL的浓度范围内,抑制效应呈剂量和时间依赖性。2.Survivin在 Hela细胞中呈基础性高表达,天花粉蛋白处理细胞对survivin的mRNA无明显影响,但显著性降低细胞内Survivin的蛋白水平;细胞周期分析表明,与对照组细胞相比较,天花粉蛋白降低Hela细胞周期中G2/M期细胞比率,但增加 S期细胞的数量。 结论:天花粉蛋白抑制HeLa细胞中的survivin的表达是天花粉蛋白促进子宫颈癌Hela细胞凋亡的机制之一。