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目的：类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)是由T、B淋巴细胞共同参与的、以损害滑膜、软骨和骨的系统性自身免疫性疾病。跨膜激活剂及钙调亲环素配体相互作用分子(transmembrane activator or calcium-modulating cyclophylin ligand-interactor, TACI)的胞外段和人免疫球蛋白(immunoglobulin, Ig) G1的Fc段，可以作为一种诱骗受体，竞争性与T、B细胞表面的真受体结合，并且中和B淋巴细胞刺激因子(B lymphocytestimulator, BLyS)与增殖诱导配体(A proliferation-inducing ligand, APRIL)的活性，对自身免疫性疾病有效。本文以肠系膜淋巴结(mesenteric lymph node, MLN)为实验研究对象，首次考察TACI-Ig对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis, AA)大鼠MLN的组织病理、辅助性T淋巴细胞(helper T lymphocyte, Th)分泌的细胞因子、T细胞主要亚群比例及活性的变化以及对TACI、B细胞成熟抗原(B-cell maturation antigen, BCMA)和B细胞活化因子受体(B cell-activating factor of the TNF family receptor, BAFF-R)受体的表达及蛋白功能的影响，探讨BLyS/APRIL-受体信号转导通路在AA大鼠MLN病理机制中的作用及TACI-Ig对其的影响。方法：本课题在观察TACI-Ig对AA大鼠的治疗作用的基础上，以整体、细胞和细胞因子为基础，从分子水平研究TACI-Ig对AA大鼠肠系膜淋巴结淋巴细胞(mesentericlymph node lymphocytes, MLNLs)的作用。Sprague-Dawley (SD)大鼠右后足跖皮内注射完全弗氏佐剂(complete Freund’s adjuvant, CFA)建立大鼠AA模型。同时设生理盐水做对照组。造模成功后，将大鼠分为正常对照组，模型对照组，TACI-Ig (0.7、2.1、6.3mg/kg)治疗组，rhTNFR:Fc (2.8mg/kg)和MTX (0.5mg/kg)阳性对照组，IgG-Fc(6.3mg/kg)阴性对照组，共8组。苏木素和伊红(hematoxylin and eosin, HE)染色显微镜下观察AA大鼠MLN的组织病理学变化；酶联免疫吸附法(enzyme-linkedimmunosorbent assay, ELISA)检测AA大鼠MLN组织匀浆中BLyS、APRIL、干扰素-γ(interferon-gamma, IFN-γ)、白介素-4(interleukin, IL-4)、转化生长因子-β1(transforminggrowth factor-beta1, TGF-β1)和IL-17的水平变化；免疫组化法检测MLN组织中TACI、BCMA和BAFF-R表达情况；Western blot法检测MLN组织总蛋白中TACI、BCMA和BAFF-R蛋白表达水平及受体功能情况。处死AA模型大鼠，取MLN组织，分离培养其中的MLNLs，给予rhBLyS (10-4μg/L)体外刺激细胞增殖。设置TACI-Ig五个浓度给药组(10-5,10-4,10-3,10-2,10-1μg/L)和一个阴性对照组IgG-Fc (10-2μg/L)。细胞培养48h后，MTT法检测MLNLs增殖能力变化；流式细胞仪检测MLNLs中T细胞主要亚群所占比例及活性变化。结果：1TACI-Ig改善AA大鼠MLN组织病理学表现致炎d35天，AA模型组和IgG-Fc阴性对照组大鼠的MLN组织病理学表现为光学显微镜下可见MLN组织中副皮质区明显扩大，髓质内炎性细胞浸润，髓索内巨噬细胞数量增多，淋巴结呈特异性滤泡增生。显微镜下病理评分发现，与阳性对照组结果相似，TACI-Ig (0.7、2.1、6.3mg/kg)治疗给药(sc, d16-d35)可明显降低病理评分，改善AA大鼠MLN的病理表现。2TACI-Ig降低AA大鼠MLN中Th1、Th17相关细胞因子IFN-γ和IL-17的水平，提高Th2、Treg相关细胞因子IL-4和TGF-β1的水平与正常组相比，AA大鼠MLN中的Th1细胞因子IFN-γ和Th17细胞因子IL-17的水平显著升高，而Th2细胞因子IL-4和Treg细胞因子TGF-β1的水平显著下降。与阳性对照组结果相似，TACI-Ig (0.7、2.1、6.3mg/kg)(sc, d16-d35)治疗给药降低AA大鼠MLN中升高的IFN-γ和IL-17的水平，升高AA大鼠MLN中降低的IL-4和TGF-β1的水平。并且TACI-Ig (0.7、2.1、6.3mg/kg)治疗给药可以显著性降低Th1/Th2比值，提高Treg/Th17比值。3TACI-Ig降低AA大鼠MLN中BLyS、APRIL细胞因子的水平与正常大鼠相比较，AA模型组大鼠MLN中BLyS和APRIL的水平均显著升高。与阳性对照组结果相似，TACI-Ig (0.7、2.1、6.3mg/kg)治疗给药(sc, d16-d35)可以显著降低AA大鼠MLN中升高的BLyS和APRIL的水平。4TACI-Ig降低AA大鼠MLN组织中TACI和BCMA表达，提高BAFF-R的表达免疫组化结果显示，TACI-Ig (0.7、2.7、6.3mg/kg)(sc, d16-d35)治疗组和rhTNFR:Fc (2.8mg/kg)阳性对照组显著降低TACI和BCMA受体表达，显著提高BAFF-R受体表达。5. TACI-Ig调节AA大鼠MLN总蛋白中TACI、BCMA和BAFF-R受体蛋白功能TACI-Ig (0.7、2.1、6.3mg/kg)治疗给药(sc, d16-d35)可上调AA大鼠MLN总蛋白中BAFF-R蛋白的表达，下调TACI和BCMA蛋白水平。提示TACI-Ig通过调节TACI、BCMA和BAFF-R受体表达水平，恢复BLyS/APRIL-受体功能正常转导信号，发挥治疗作用。6. TACI-Ig降低rhBLyS诱导的AA大鼠MLNLs过高的增殖能力，调节T淋巴细胞主要亚群的比例及活性无菌取AA大鼠MLN，分离培养得到淋巴细胞，rhBLyS (10-4μg/L)体外刺激MLNLs异常增殖，TACI-Ig (10-5,10-4,10-3,10-2,10-1μg/L)5个浓度给药组可抑制AA大鼠MLNLs增殖能力，降低总Th细胞(CD3+/CD4+)和活化T细胞(CD4+/CD25+)的细胞百分含量，能够升高未致敏T细胞(CD4+/CD62L+)的细胞百分含量。结论：1. TACI-Ig改善MLN的病理表现，抑制MLNLs增殖能力，降低病理评分。2. TACI-Ig降低AA大鼠MLN中升高的BLyS、APRIL、Th1细胞因子IFN-γ、Th17细胞因子IL-17，提高AA大鼠MLN中降低的Th2细胞因子IL-4和Treg细胞因子TGF-β1的水平。另外，TACI-Ig降低总Th细胞(CD3+/CD4+)和调节性T细胞(CD4+/CD25+)的细胞百分含量，能够升高未致敏T细胞(CD4+/CD62L+)的细胞百分含量。提示，AA大鼠病理机制中，BLyS、APRIL、Th1、Th2、Treg、Th17细胞因子水平以及T细胞亚群失平衡，调节AA大鼠Th1/Th2、Treg/Th17细胞因子及T细胞亚群产生平衡，是TACI-Ig发挥治疗作用的重要机制之一。3. TACI-Ig治疗给药可上调AA大鼠MLN中降低的BAFF-R蛋白的表达，下调其过高的TACI和BCMA蛋白的表达。通过调节TACI、BCMA和BAFF-R受体表达水平，恢复BLyS/APRIL-受体功能正常转导信号，抑制MLNLs过度增殖，从而诱导AA大鼠免疫耐受与免疫反应的平衡。