精油成分和芽孢杆菌DT对大米腐败真菌及黄曲霉毒素B1的防控研究

来源 :浙江大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dragon1788
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
大米在采后储藏期间极易受曲霉菌(Aspergillus spp.)所侵染,导致大米腐败变质。部分曲霉菌可产生强致癌的次级代谢物黄曲霉毒素B1(AFB1)并残留在大米中,不仅造成粮食浪费和经济损失,还严重危害人们的健康。目前对大米防控常用化学防腐杀菌剂与脱毒剂,但存在化学残留及环境污染等因素而限制其使用种类和应用范围。因此,寻找高效且环境友好的防腐脱毒剂具有重要性与必要性。本文以大米常见的腐败病原菌黄曲霉菌(A.flavus)、赭曲霉菌(A.ochraceus)和AFB1为研究对象,筛选具有优良抗菌活性的植物精油成分(Essential oil components,EOCs)运用于大米储藏中,并进行相关机制探讨,旨在全面分析精油成分对侵染大米腐败菌的防控作用;同时筛选出具有高效去除AFB1能力的微生物,并研究AFB1脱除反应过程、反应前后毒理效应以及生物脱毒转化规律。开展系统的微生物安全性评估,为扩大微生物的推广应用提供保障。最后将精油成分与脱毒微生物联合应用在大米防腐过程中,旨在从源头上控制霉菌并减少或去除已被毒素污染大米中的AFB1,主要研究结果如下:
  (1)多种精油成分的体外抗菌活力比较及在大米中的应用研究
  前期研究显示许多精油具备抑菌活性,通过比较多种植物精油中普遍存在的组分对腐败菌的抑制活力,确定了两种具有最佳抑菌活性的化合物香叶醇和柠檬醛,其中柠檬醛在体外对黄曲霉和赭曲霉的最低抑菌浓度(MIC)分别为0.5μL/mL和0.4μL/mL。同时将香叶醇和柠檬醛分别用于大米中的试验表明香叶醇和柠檬醛均能显著抑制大米中的微生物数量、延缓MDA含量和脂肪酸值的上升,维持大米淀粉颗粒的完整性,且防腐效果部分优于或接近于商业化学储粮熏蒸剂磷化铝。
  (2)香叶醇和柠檬醛分别对黄曲霉和赭曲霉的作用机制及结合气调包装对大米腐败防治的增效应用
  从细胞膜通透性、细胞内活性氧变化和霉菌生长相关基因角度分别探讨了香叶醇和柠檬醛对黄曲霉和赭曲霉的作用模式,结果表明香叶醇则分别通过诱导黄曲霉胞内活性氧的产生和改变赭曲霉的膜通透性来显示抗菌作用。柠檬醛主要通过下调黄曲霉的产孢基因brlA及代谢基因laeA的表达量,抑制赭曲霉的生长基因pacC来发挥抑菌特性,并且柠檬醛还可以影响曲霉菌的部分次级代谢产物基因如可以干预调控黄曲霉毒素合成基因aflR和显著降低赭曲霉中编码参与赭曲霉毒素合成的前体酶基因pks、P450-B03的转录水平。结合扫描电镜观察到曲霉菌经过香叶醇处理后其自身微观结构遭到破坏,并伴有细胞内容物溢出,进一步证实香叶醇能显著影响曲霉菌的膜通透性来发挥抑菌防霉作用。同时,柠檬醛和香叶醇分别与50%CO2+50%N2或75%CO2+25%N2气体成分的包装结合对大米的防控效果优于磷化铝熏蒸剂,可起到完全替代磷化铝的作用。
  (3)芽胞杆菌对AFB1的去除作用
  通过以AFB1类似物的香豆素为唯一碳源培养基进行初筛和高校液相色谱(HPLC)分析复筛获得一株具有去除AFB1能力的新型菌株,经鉴定为阿耶波多氏芽胞杆菌DT,并探究不同反应条件对其清除AFB1的影响,结果表明菌株DT在37℃、pH8反应72h后对2.0μg/mL的AFB1达82.92%清除率。另外,AFB1的毒性评估模型表明AFB1经过阿耶波多氏芽孢杆菌DT处理后对大肠杆菌基本没有毒性作用,且能更好地维持LO2、Caco-2和HaCaT的细胞活力。此外,通过液质联用(HPLC-MS)推测菌株DT与AFB1反应过程中新生成产物的毒性作用减弱是由于原AFB1的内酯结构遭到破坏。
  (4)芽胞杆菌菌株安全性评估并分别与柠檬醛和香叶醇联用对大米的防腐脱毒作用
  采用不同剂量(108、109和1010CFU/g)的芽胞杆菌DT,一次性灌胃ICR级小鼠并进行15d饲养试验,结果表明不同剂量菌株DT处理的小鼠体重、摄食量、饲料转化率与对照组相比均无明显异常;脏器指数均无显著性差异;组织切片观察小鼠的肝脏、肾脏形态均未发生病变,无明显炎症反应,表明菌株DT在1010CFU/g范围内是实际安全无毒。同时,将菌株DT与柠檬醛和香叶醇共同运用于大米的防治试验中,发现在大米储藏后期,菌株DT与香叶醇共同处理对2.0μg/mL的AFB1去除率为83.88%,其菌落数量为对照组的5%,表明菌株DT与0.5μL/mL的香叶醇不会相互干扰,能共同发挥各自的功效。
  综上所述,本文确定了植物精油成分中香叶醇和柠檬醛对黄曲霉和赭曲霉的优良抑制效果,证实了香叶醇和柠檬醛在大米中的防腐作用,并探讨其与腐败病原菌的作用机制。同时筛选获得一株体外去除AFB1的阿耶波多氏芽胞杆菌DT,对其脱毒功效和安全性进行评估,并将其分别与香叶醇和柠檬醛联合运用实现对大米中黄曲霉菌侵染的源头控制且对被AFB1污染的大米进行脱毒的双重防护,为开发新型绿色储粮防霉脱毒剂奠定理论基础,提供实际指导意义。
其他文献
目前主流的脑功能检测技术包括:功能近红外光谱技术(Functional Near-infrared Spectroscopy,fNIRS)、功能核磁共振成像技术(Functional Magnetic Resonance Imaging,fMRI)和脑电图(Electroencephalograph,EEG)等。其中fNIRS可在空间分辨率和时间分辨率之间取得相对平衡,具有无创、安全和成本低等优点
微循环水平的血流负责向组织输送氧气和营养物以及代谢副产物的清除,组织血流测量可以为许多血管或细胞疾病的诊断和治疗提供关键信息。血流速度作为组织血流测量中的重要指标,对其无创连续检测在临床诊断和治疗方面有重要意义。  扩散相关光谱法(diffuse correlation spectroscopy, DCS)是一种无创检测组织相对深层血流变化的近红外检测方法。它不仅可以实现对深层组织信息的探测,而且
目的:探讨碘结合人工肝支持系统(ALSS)治疗甲亢合并重型肝炎的安全性及临床应用价值。方法:将43例甲亢合并重型肝炎的患者按治疗方案分成二组:A组抗甲状腺药物(ATD)组,18例患者接受ATD和护肝综合治疗;B组碘组,25例患者接受碘和护肝综合治疗。其中B组又分为二组:B1组非ALSS组,12例患者接受碘和常规护肝综合治疗;B2组ALSS组,13例患者接受ALSS、碘和常规护肝综合治疗。所有患者分
学位
  目的:Alzheimer’s病(AD)是影响记忆和认知功能的进行性退行性神经病变,是痴呆最常见的原因。β淀粉样蛋白(Aβ)增加是AD中枢病因性过程,凝聚态Aβ具有明确的神经毒性作用,但有人提出,非凝聚态Aβ可能也具有神经毒性作用。本论文研究了非凝聚态Aβ25-35对新生大鼠海马CA3区锥体神经元瞬时外向钾电流IA和延迟整流钾电流IK的影响,探讨电压门控性钾通道在AD发病机制中的作用,从而为应用
芒果浆是指新鲜芒果经打浆后的制成品,常用作芒果风味制品的原料。在生产和流通环节中,芒果浆通常采用冷冻方式保存。在二次加工前,冷冻芒果浆需解冻,目前生产中常用静水解冻,然而该解冻方式耗时长、生产效率低。因此,本文将超声波应用于芒果浆的解冻过程,优化超声辅助解冻芒果浆的条件,以期提高解冻速率;然后研究在优化条件下反复冻融对芒果浆品质的影响,以验证该优化条件的可靠性;最后采用COMSOL软件仿真超声辅助
学位
杨梅(Myrica RubraSieb.et Zucc)为中国的特产水果,其口感酸甜、色泽诱人,富含花色苷等酚类物质,具有多种保健功能。杨梅果汁产品能有效地保留原果的营养成分,满足长期食用。为了提高果汁的品质和生产效率,避免和减少贮藏过程中混浊的产生,探究高效、条件温和的澄清方法和技术是目前杨梅果汁生产过程中的关键问题。本文选用了黄原胶、壳聚糖、海藻酸钠、琼脂、瓜尔胶和刺槐豆胶6种多糖类澄清剂澄清
学位
植物盐(plant-salt)通常是指从高盐环境生长的植物中提取得到的、钠含量低并同时含有其他多种常量和微量元素的生物质盐,其NaC1含量一般在20%左右。传统的竹盐(bamboo-salt)是将日晒海盐(即原盐)装入竹筒中在高温下烤制而成,尽管在烤制过程中原盐吸收了一定量的竹筒有效成分,但从严格意义上讲,竹盐并不属于植物盐的范畴。  本课题组前期创造性地在竹盐制作新工艺中引入了中频熔炼技术,并采
枸杞(Lycium barbarum)是我国传统药食两用植物,枸杞多糖(LBP)被认为是枸杞果实中最主要的活性成分之一,具有许多生物学功效。目前所用的提取方法以热水提取以及基于水提取的新型辅助提取方法为主。大量的文献报道,不同的提取方法将会释放细胞壁中不同的部分,使得多糖化学结构有所差异,从而引发功能的不同。但对于枸杞多糖还没有相对完整的研究,提取方法与理化性质之间的关系尚不清楚。因此,本研究以枸
学位
近年来,气凝胶由于其良好的机械性能、高孔隙率、阻热性和生物可降解等特性,已然成为医药、化工、建筑等领域的研究热点。海藻酸钠作为一种常见的多糖,具备良好的胶凝性能,是制备气凝胶的优良材料。但是,单纯海藻酸钠形成的气凝胶存在机械性能差、孔隙率低、热稳定性差等问题,限制了其在食品行业的应用。本论文通过构建多组分的海藻酸钠基气凝胶,提高其物理特性,并研究其在食品领域的应用。具体内容如下:  (1)通过溶胶
芽孢的灭活效果与机制及其应用研究一直以来都是食品工业所面临的严峻挑战和重要课题。蜡样芽孢杆菌(B.cereus)对高温、辐射等条件均具有高抗性,在谷物、乳制品等食品中污染严重,因此有必要开发高效、处理条件温和且环境友好的灭菌方法来减少甚至灭活芽孢。近年来,非热杀菌技术成为新型杀菌技术研究和开发的重点,等离子体技术在非热杀菌领域的应用迅速发展,等离子体活化水(PAW)具有杀菌效率高、处理量大、流动性
学位