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目的: 探究Sonic Hedgehog(Shh)信号通路与食管癌放射抗拒的关系，进一步研究上调shh信号通路关键因子Gli1对食管癌放射抗拒性的影响。 方法: 1、以人食管癌细胞Eca109为亲本株，通过X射线反复照射（累计照射剂量60 Gy）诱导形成放射抗拒细胞株Eca109R。 2、采用克隆形成实验检测Eca109与Eca109R细胞的放射敏感性。 3、CCK-8实验检测Eca109与Eca109R细胞的细胞活力。 4、免疫荧光及Western blot检测Eca109与Eca109R细胞内Gli1蛋白与Shh蛋白的表达。 5、Eca109细胞转染过表达Gli1质粒，RT-PCR与Western blot检测转染后细胞内Gli1与Shh的表达。 6、克隆形成实验检测转染前后细胞的放射敏感性。 7、流式细胞仪检测转染前后细胞的细胞周期。 结果: 1、克隆形成实验显示用相同剂量的X线照射Eca109和Eca109R细胞后，Eca109和Eca109R细胞的存活分数(SF2)分别为0.499±0.042和0.937±0.013，证实Eca109R细胞有明显的放射抗拒性，诱导形成放射抗拒株成功。 2、CCK8实验显示，Eca109R细胞的活力抑制率明显低于Eca109(p＜0.05)。 3、Western blot实验结果显示Eca109R细胞中的Gli1与Shh蛋白表达明显高于Eca109细胞(p＜0.05)。免疫荧光结果显示Eca109R细胞中Gli1表达明显高于Eca109细胞(p＜0.05)。 4、RT-PCR与Western blot结果均显示Eca109细胞转染过表达Gli1质粒后，与未转染的Eca109细胞相比，Gli1与Shh表达明显高于Eca109细胞(p＜0.05)。 5、克隆形成实验显示转染后的Eca109细胞相对未转染细胞具有明显的放射抗拒性。 6、未转染与转染Gli1的Eca109细胞在照射6Gy与8Gy后，均出现了G2/M期阻滞，而转染Gli1的Eca109细胞S期细胞比例高于未转染的Eca109细胞。 结论: 上调Shh信号通路关键因子Gli1能够增强食管癌的放射抗拒性，这一过程可能是通过调控细胞周期实现的。