猪圆环病毒是迄今发现的最小的动物病毒之一。现已知PCV有两个血清型，即PCV1和PCV2。PCV1为非致病性的病毒，PCV2为致病性的病毒。PCV2是断奶仔猪多系统衰竭综合征的主要病原，并且与猪皮炎与肾炎综合征、以及猪呼吸道综合征、先天性震颤、肠炎、繁殖障碍等疾病的发生有关。自1991年被发现以来，猪圆环病毒已成为世界范围内危害养猪业最大的病原体之一。因此PCV2的早期临床诊断，对于PCV2的防控是至关重要的。本研究建立了一种简便、快速、灵敏的试验方法和工具，研制出可用于临床血清检测的PCV2型抗体检测试剂盒。　　PCV2基因组包含有11个开放阅读框，其中ORF1和ORF2是最主要的阅读框。ORF1编码Rep蛋白，主要与病毒复制有关，此类蛋白在这两型病毒之间的同源性为85％，是引起PCV1和PCV2抗原交叉反应的主要原因。ORF2编码Cap蛋白，此类是病毒的主要结构蛋白，是型特异性抗原，具有良好的免疫原性，在两型PCV之间不发生抗原交叉反应，所以ORF2蛋白可以作为抗原建立区别两型PCV的血清学检测方法。　　ORF2所编码蛋白的N端的信号肽序列与抗原性无关，会影响蛋白的可溶性表达。本实验将去除N端信号肽的ORF2片段在大肠杆菌中BL21(DE3)中进行了表达。SDS-PAGE凝胶电泳表明在26 kD处有一个明显的表达条带，与预期结果一致，表明重组蛋白表达成功。　　为提高ORF2蛋白表达的产量，通过对诱导时间、IPTG浓度进行优化，最终确定终浓度为0.8 mM的IPTG诱导10个小时可以使ORF2的产量达到最高。同时确定在30℃诱导的条件下，ORF2的可溶性蛋白产量最高。使用镍柱亲和层析对表达的可溶性蛋白进行纯化，使用猪圆环病毒阳性血清对纯化后的ORF2蛋白进行Western blot鉴定，结果表明，重组ORF2蛋白具有良好的反应原性，可以作为包被原进行猪圆环病毒抗体的检测。　　以表达的ORF2蛋白作为包被原，建立了检测猪圆环病毒抗体的间接ELISA方法：最佳抗原包被浓度为5μg/mL，最佳包被时间为4℃过夜，最佳封闭液为5%脱脂奶，一抗最佳稀释度为1:1000，作用时间为30 min，二抗最佳稀释度为1:4000，作用时间为1 h，最佳显色时间为5 min。当血清P/N值大于0.356时，为阳性；当血清P/N值小于0.317时，为阴性。与商品化试剂盒同时检验78份临床血清，符合率为95%；同时与猪瘟病毒，猪细小病毒株、猪蓝耳病毒，猪乙脑病毒，猪伪狂犬病毒的阳性血清均无交叉反应。　　本研究表达了去除信号肽序列的猪圆环病毒ORF2蛋白，作为包被原建立了检测PCV2抗体的间接ELISA方法，为PCV2的临床诊断与流行病学研究提供了简便、快速的检测方法和工具，也为PCV2 ELISA抗体检测试剂盒的进一步优化提供了技术资料。