【摘 要】
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从中国广东省分离、鉴定了9株鸡新城疫病毒(NDV),并测定了其毒力.这9株NDV均能凝集鸡的红血球,其HA效价为2~2,其与NDV抗血清的反应均呈阳性,而与H、H亚型的AIV单因子抗血清的
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从中国广东省分离、鉴定了9株鸡新城疫病毒(NDV),并测定了其毒力.这9株NDV均能凝集鸡的红血球,其HA效价为2<6>~2<9>,其与NDV抗血清的反应均呈阳性,而与H<,5>、H<,9>亚型的AIV单因子抗血清的反应均呈阴性.测定了两个分离株(Ch-GD1和Ch-GD2)的鸡胚平均致死时间(Mean Death Time of chicken embryos,MDT)和脑内致病指数(Intracerebral Pathogenicity Index,ICPI),结果表明,Ch-GD1的MDT为48h、ICPI为1.81,Ch-GD2的MDT为55.2h、ICPI为1.8,证明这两个NDV分离株均为强毒株.应用RT-PCR方法,一次性扩增出9株新城疫病毒F基因的全序列,将其克隆到pGEM-T Easy载体中,经PCR、酶切分析等方法证明获得F基因的阳性克隆.扩增出的9株NDV分离株的F基因大小均为1662bp,编码553个氨基酸.序列分析表明测定的9株NDV广东分离株F蛋白裂解位点区(112~117aa)氨基酸序列为<112>R-R-Q-K-R-F<117>,与国内外发表的NDV强毒株在这一区域的序列相同,证明均为强毒株;系统发育树分析表明这9个NDV分离株均与Ch/99、Ch/2000等在一个分枝上,属于基因Ⅶ型毒株.9个分离株的F基因均有6个糖基化位点,其中Ch-GD2有13个半胱氨酸残基,其他8个分离株均有12个半胱氨酸残基.说明国内不同地区的NDV流行毒株F基因的同源性相差是很大的,即使是属于同种毒力型,其同源性也可能相差很大;中国现行的疫苗毒株主要为Ⅰ系(Maktesuar)、Ⅱ系(B1)、Ⅲ系(F)、Ⅳ系(LaSota)和V4株等,均属于经典型(基因Ⅰ、Ⅱ型),而中国近年来流行的ND的基因型主要为基因Ⅶ型,这也许能够解释为什么中国近几年各地相继爆发ND,且爆发鸡群的免疫抗体水平均较高.
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