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生物防治作为防治植物病害的重要措施,因其与环境友好、维持生态平衡、有利于人类健康等优点,受到越来越多研究者的关注和重视。菌株MT-06(Talaromycesflavus)是从草莓炭疽病标样上分离获得的一株具有很好生防效果的真菌菌株,本文对它的生物学特性、生防机制及田间防效进行了研究,为进一步实现产业化应用奠定了基础。主要研究结果如下:
1.选用13种常见病原菌与MT-06菌株平板对峙培养,测定MT-06菌株的抑菌谱;采用单因子实验设计,分别测定不同培养基成分、温度、pH和光照间隔处理对MT-06菌株营养生长及产孢的影响;经PCR扩增克隆鉴定了MT-06菌株的ITS和β-tubulin序列,结合形态观察,对MT-06菌株进行了菌种鉴定。结果表明:MT-06具有广谱抗菌性,对多种病原菌具有拮抗作用;该生防菌营养生长的最适条件是PDA或PSA培养基,初始pH为5,28~35℃,24小时全光照培养;在查氏培养基上,25~28℃,24小时全光照条件下孢子产量最高。经形态观察和ITS序列及β-tubulin序列分析,将菌株MT-06鉴定为Talaromyces.flavus。
2.构建了2个荧光表达载体pGFP和pRFP,并通过ATMT方法将pGFP转化到MT-06菌株和稻瘟病菌中,将pRFP转化到草莓炭疽病菌中,经过几轮验证,确定GFP和RFP基因已经成功插入到目的真菌的基因组中,但是荧光在MT-06菌株和草莓炭疽病菌中表达较弱。同时,通过将MT-06菌株与草莓炭疽病菌进行玻片对峙培养,发现有菌丝缠绕现象。
3.研究了MT-06发酵液对10种病原菌的抑制效果及其热稳定性,结果表明,MT-06发酵液对多种病原菌具有抑制作用,对高温高压也有较好的耐受性,说明MT-06菌株可以产生外泌物质抑制病原菌的生长。
4.研究了MT-06菌液对草莓炭疽病和白粉病的田间防治效果,及其对草莓苗炭疽病枯死率和产苗量的影响,并测定了MT-06在草莓苗上的定殖能力。结果表明,MT-06对草莓炭疽病和白粉病具有较好的田间防治效果,高于或相当于化学药剂,有利于降低草莓苗炭疽病枯死率和提高产苗量,在草莓苗上的定殖力也很强,最高可达100%。