食线虫真菌蠕虫埃斯特菌菌株NKF13222的鉴定及侵染研究

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蠕虫埃斯特菌(Esteya vermico la)是首次报道寄生松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)一种食线虫真菌。本文对分离自巴西进境木质包装材料中截获的鲁尔夫伞滑刃线虫(B. rainulfi)的一株内寄生真菌菌株NKF 13222进行了形态学与分子生物学特征鉴定,确定其为蠕虫埃斯特菌的一个新菌株,并对该菌株的生物学特性及其侵染重要植物寄生线虫的能力进行了研究,旨在探索该菌株对植物寄生线虫的生防潜力以及为可能的工业化开发利用提供理论依据。主要结果如下:形态学特征上,菌株NKF 13222能产生新月形和杆状两种孢子,两种孢子萌发方式不同,只有新月形孢子能黏附并侵染线虫。菌株NKF 13222与台湾报道寄生松材线虫的蠕虫埃斯特菌菌株ATCC 74485的形态特征很相似,而与捷克菌株CBS 115803和韩国菌株CNU 120806在孢子形成和孢子萌发方式上有差异。基于β-tubulin和EF1-α两个基因序列构建的系统发育树揭示菌株NKF 13222与台湾菌株ATCC 74485亲缘关系更近。菌株NKF 13222生长特点表现为,在营养丰富的PDA培养基菌丝生长良好,产生大量的杆状孢子,在营养匮乏的WA培养基上产生较多的新月形孢子;菌株生长的适宜温度范围为20℃~30℃;在pH 4.5-8.5培养基中菌株可较好生长;在全暗条件下菌株的生长速度比光照条件下的快;糖浓度对菌株的生长影响不明显。碳源为半乳糖、氮源为蛋白胨的液体培养基较适宜菌株产孢,且半乳糖与蛋白胨比为100:1时,产孢量最高达到8.52×108个孢子/mL菌株NKF 13222对7种植物寄生线虫的诱引、黏附和侵染能力结果显示,它对松材线虫、拟松材线虫(B. mucronatus)、腐烂茎线虫(Ditylenchus destructor)和水稻干尖线虫(Aphelenchoides besseyi)均有诱引作用,而对南方根结线虫(Meloidogyne incognita)、禾谷孢囊线虫(Heterodera avenae)和穿刺短体线虫(Pratylenchus penetrans)无诱引作用;粘性分生孢子黏附具有诱引现象的4种线虫,24小时内的黏附率达82%-99%;粘性分生孢子对4种线虫的侵染力差异显著,接种7天后的松材线虫死亡率高达98%,而拟松材线虫、腐烂茎线虫和水稻干尖线虫死亡率分别为43%,35%和9%。研究表明菌株NKF13222不仅是松材线虫的强内寄生真菌,而且对其它重要植物寄生线虫的生物防治也具有一定的应用潜力。
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