【摘 要】
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红掌(Anthuriun andreanum Lind.)又名花烛、安祖花,为天南星科花烛属植物,终年开花,且花枝独特,观花观叶俱佳,是世界著名的热带花卉。目前市场上供应的大部分红掌品种均无香味,本
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红掌(Anthuriun andreanum Lind.)又名花烛、安祖花,为天南星科花烛属植物,终年开花,且花枝独特,观花观叶俱佳,是世界著名的热带花卉。目前市场上供应的大部分红掌品种均无香味,本研究尝试利用农杆菌介导法将罗勒(Ocimum basilicum)芳香醇合成酶(linelool systhase,LIs)基因转入红掌,以改良其芳香品质。LIS编码R-芳香醇合成酶,是芳香醇合成的关键酶,可以催化香叶基蕉磷酸生成芳香醇。
本研究以红掌组培苗的带芽茎段为外植体,建立了红掌的高效再生体系,构建了LIS植物表达载体,利用农杆菌介导法对红掌进行了遗传转化,经PCR检测表明芳香醇基因转入红掌体内。并对影响遗传转化的因子进行了研究,主要研究结果如下:
(1)建立了4个红掌品种‘Pink Champion’(粉冠军)、‘Valentino’(华伦天奴)、‘Sweet Heart’(甜梦)、‘Arizona’(亚历桑娜)的再生体系:红掌类原球茎诱导的最佳外植体为带芽的茎段,并筛选出同时满足四个红掌品种类原球茎诱导、增殖、分化的最佳培养基MS+6-BA0.5 mg/L;
(2)构建了LIS基因的植物表达载体(pMOGMON-LIS),并导入根癌农杆菌EHA105菌株;
(3)建立了以类原球茎为外植体的遗传转化体系:类原球茎预培养3天,27℃时农杆菌菌液浸染20 min,加AS100 μmol/L,农杆菌共培养3天,红掌类原球茎对潮霉素筛选的适宜浓度为40 mg/L,最终得到了7株抗性再生植株,经PCR检测7株再生苗均为转基因植株。
(4)利用根癌农杆菌介导法将p35SEGFP转入红掌类原球茎中,经PCR和荧光检测,EGFP已经转入红掌体内。
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