论文部分内容阅读
目的:本试验是为了研究p27、Cyclin E和Ki-67在垂体腺瘤组织中的表达,并探讨p27、Cyclin E和Ki-67与垂体腺瘤侵袭性的关系及三者之间的关系;和三者在不同类型垂体腺瘤中的表达情况。
方法:研究了p27,Cyclin E和Ki-67在不同类型的垂体瘤中的表达,由良性垂体腺瘤到侵袭性垂体腺瘤。研究了60例垂体组织,包括5例正常垂体组织,促肾上腺皮质激素腺瘤10例,生长激素腺瘤12例,无功能腺瘤15例,泌乳素腺瘤8例,侵袭性垂体腺瘤10例。所有肿瘤组织和正常垂体组织均采用石蜡切片(4um),石蜡切片(4um),常规脱蜡至水。蒸馏水冲洗,PBS浸泡5分钟。柠檬酸高压修复抗原1分钟,PBS稀释的鼠抗人p27单克隆抗体、鼠抗人Cyclin E和鼠抗人Ki-67抗体,37℃2小时,同时以PB S代替一抗作为阴性对照,PBS洗片,3分钟*3次增强剂孵育20分钟。辣根酶标记链霉卵白素37℃孵育30分钟,PBS洗片,3分钟x3次DAB显色10分钟,蒸馏水充分冲洗,复染,苏木素衬染,梯度酒精脱水后,中性树脂封片。人类扁桃腺做为阳性对照组,因为人类扁桃腺组织中含有不同增殖程度的淋巴组织。在扁桃腺滤泡的外周,细胞主要处于静止期,而在中央区则为高增殖活性的细胞。同时以PBS代替一抗作为阴性对照。所有标本都由同一专业人员进行观察,并且事先不知道每一例标本的情况,每个标本观察500个细胞。统计学分析采用非参数检验。各组间总体比较使用Kruskal-Wallis检验,各组之间的两两比较采用Mann-Whitney检验。
结论:p27,Ki-67的表达与垂体腺瘤的侵袭性及细胞增殖活性(潜在恶性程度)密切相关,对于指导垂体腺瘤术后预后有一定参考价值;在不同类型垂体腺瘤中促肾上腺皮质激素腺瘤p27有更低表达,Cyclin E有更高表达,提示促肾上腺皮质激素腺瘤比其他垂体腺瘤有更高的细胞增殖活性,且p27的降低与Cyclin E的升高关系密切;而p27表达在侵袭性垂体腺瘤中较正常垂体组织和其它良性垂体腺瘤更低,但Cyclin E的表达在侵袭性垂体腺瘤与其他类型垂体腺瘤及正常垂体组织相比较却无明显变化,虽然促肾上腺皮质激素腺瘤与侵袭性垂体腺瘤一样具有高细胞增殖活性,但是两者P27降低的机制不同。在促肾上腺皮质激素腺瘤中p27的降低可能与Cyclin E的升高有直接的关心,而在侵袭性垂体腺瘤中则没有这种联系。P27与 Ki-67有明显负相关性,在促肾上腺皮质激素腺瘤中Cyclin E与 p27呈明显负相关性,p27,Cyclin E与 Ki-67结合能够更好的反应垂体腺瘤的增殖活性和侵袭性。