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OqxAB是近年新发现的一种可同时介导细菌对喹嗯啉类药物、氯霉素和喹诺酮类等抗菌药物耐药的多重耐药外排泵,属于RND(Resistance-nodulation-divisionfamily)家族,近年来又被归入质粒介导的喹诺酮类耐药机制(plasmid-mediatedquinolone resistance,PMQR)中。木研究拟比较不同来源大肠杆菌中 oqxAB基因及其他PMQR基因的的流行情况,并分析OqxAB对抗菌药物耐药性的影响。
采用PCR法对2007～2009年主要分离自广东省的1459株大肠杆菌(包括猪源345株、鸡源191株、鸭源332株、奶牛源40株、人源110株、宠物源251株和动物件食品源190株)进行oqxAB基因和其他PMQR基因的检测。结果显示:宠物源、人源、鸡源、动物性食品源、牛源、鸭源和猪源大肠杆菌中oqxAB的阳性率分别为9.6％(24/251)、10.9%(12/110)、12.6%(24/191)、24.2%(46/190)、47.5%(19/40)、48.4%(161/332)和51.3%(177/345),总阳性率为31.6%(461/1459)。猪源、鸭源和牛源明显高于宠物源、鸡源和人源。检测到的其他PMQR基因有qnrA、qnrB、qnrS,qepA和aac(6)-Ib-cr。qnrA基因检测到4株,经测序比对确认为qnrA3,阳性率为0.27%(4/1459);qnrB基因检测到15株,阳性率为1.0%(15/1459),经测序比对确认有12株为qnrB6,2株为qnrB2,1株为qnrB10;qnrS检测到126株,阳性率为8.64%(126/1459),经测序比对111株为qnrS1,15株为qnrS2;aac(6)-Ib基因检测到145株,阳性率为9.9%(145/1459),经测序比对有119株为aac(6)-Ib-cr,阳性率为8.16%(119/1459);qepA检测到33株,阳性率为2.26%(33/1459);没有检测出qnrC和qnrD。在1459株不同来源的大肠杆菌中,除oqzAB外,qnrS的流行率最高(8.64%),其次为aac(6)-Ib-cr(8.16%)。接合试验表明,携带oqxAB的接合子对喹诺酮类药物的MIC升高了4～128倍,对喹嗯啉类药物的MIC值升高了4～64倍,对氯霉素的MIC值升高4～64倍。
采用琼脂稀释法测定了1459株不同来源的大肠杆菌对13种抗菌药物的MIC,其中氨苄西林、萘啶酸、复方新诺明和四环素的耐药率分别达到了80.8%(869/1459)、81.0%(1182/1459)、87.8%(1281/1459)、86.4%(1260/1459);对头孢曲松和阿米卡星较敏感,耐药率分别为22.7%(332/1459)和15.8%(131/1459)。通过对oqxAB阳性菌与阴性菌耐药率的比较发现,OqxAB阳性菌对阿米卡星的耐药率显著高于阴性菌(P＜0.05);OqxAB阳性菌对氨苄西林、四环素、头孢曲松、复方新诺明、萘啶酸、环丙沙星、庆大霉素、氯霉素、氟苯尼考及恩诺沙星的耐药率极显著高于阴性菌(P＜0.01)。不同来源的菌株巾,复方新诺明的耐药率在72.5%～95.2%,大部分都在90%以上。健康人源菌株耐药率普遍较低,除氨苄西林、萘啶酸和四环素的耐药率在35%左右外,其他药物的耐药率在0.9%～9.1%之间。动物和动物性食品来源的菌株中,除了阿米卡星和头孢曲松外,对各类抗菌药物的耐药率普遍较高,氟苯尼考、环丙沙星、氯霉素、恩诺沙星的耐药率猪源和鸭源普遍高于其他来源,可能和氟苯尼考和氟喹诺酮类药物在猪和鸭巾的大量应用有关。
通过对PMQR阳性菌株的环丙沙星MIC统计分析,发现qnr阳性菌株中有35.3%的菌株对环丙沙星的MIC在0.125～0.5mg/L之间,显示出qnr介导的细菌对喹诺酮类药物的耐药水平并不高;oqxAB、qepA、aac(6)-Ib-cr阳性菌有60%以上的菌株对环丙沙星的MIC在16mg/L以上,oqxAB、qepA、aac(6)-Ib-cr可能是细菌产生对喹诺酮类高水平耐药的重要因素。
综上所述,我国兽医临床oqxAB流行很普遍,这可能与国内大量使用喹噁啉类药物有关。