本文对一种新型CPV全基因组序列分析以及DpCPV反向遗传系统的构建进行了探讨。本研究分为三个部分：　　 第一章：文献综述，分为两部分。第一部分对质型多角体病毒(CPV)的研究进展进行了综述，包括质型多角体病毒的分子生物学，基因功能以及精细结构等方面的研究。第二部分介绍了RNA病毒反向遗传学研究进展，包括RNA病毒反向遗传学的操作原理，正链RNA病毒、负链RNA病毒以及双链RNA病毒反向遗传学的进展以及反向遗传学在生命科学领域的应用等。　　 第二章：一种新型CPV全基因组的cDNA克隆与序列分析。采用FLAC(FullLength Amplification of cDNAs)技术克隆了一种新型CPV的基因组cDNA，并完成了测序工作。序列分析表明新病毒基因组由16条dsRNA组成，大小在783bp和4051bp之间。每个片段含有一个开放阅读框，除S15和S16外每个片段的正链5端和3端存在末端保守序列5ACUUUU……UAGAGC3，S15和S165端末端保守序列与其它片段相同，但3端序列为CCAGC。新病毒的末端保守序列与已报道的CPV的末端保守序列都不相同。根据新型质型多角体病毒编码的蛋白与呼肠孤病毒科其它成员编码的蛋白的比较结果推测，新型质型多角体病毒的S1、S2、S4、S7和S9分别编码病毒的结构蛋白VP1、VP2、VP3、VP4和VP5。S5和S12编码病毒的非结构蛋白。S3编码病毒的RNA依赖的RNA聚合酶，S13编码多角体蛋白。S6、S8、S10、S11、S14、S15和S16的功能不是很清楚。基于RNA聚合酶和多角体蛋白的氨基酸序列的进化分析显示新型质型多角体病毒与4型质型多角体病毒有较近的亲缘关系，但是两者在末端保守序列和电泳型上存在明显差异。因此推测该病毒是一种目前还未报道的CPV新类型，暂命名为CPV22型。　　 第三章：马尾松毛虫质型多角体病毒(DpCPV)反向遗传系统的构建。DpCPV作为我国目前唯一登记的质型多角体病毒杀虫剂，在森林害虫防治方面发挥了巨大的作用。由于RNA的难操作性，目前对DpCPV的分子生物学研究进展相当缓慢。本章我们尝试构建DpCPV反向遗传系统，为DpCPV的分子生物学研究提供实验平台。采用体外转录的方法获取DpCPV的基因组10个dsRNA的mRNA，并共同转染Sf9细胞和Tn368细胞，形态学观察和免疫印迹实验证实在细胞中成功的拯救了DpCPV，但拯救效率较低。